[发明专利]抗ALS抑制剂类除草剂菵草的PCR检测方法及试剂盒

权利要求书

1.用于检测抗ALS抑制剂类除草剂菵草的特异性PCR引物组合，其特征在于，包括用于特异性扩增菵草ALS基因的引物对I和引物对II，引物序列如下：

引物对I：

正向引物WC-ALS-ⅠF：5’-CGCCTTACCCAAACCTACT-3’

反向引物WC-ALS-ⅠR：5’-ATGCGGCTGCTTGTTCTT-3’；

引物对II：

正向引物WC-ALS-ⅡF：5’-GATAAGGCTGACCTGTTGC-3’

反向引物WC-ALS-ⅡR：5’-TCACAGTTGACCACACTTC-3’。

2.含有权利要求1所述引物组合的用于检测抗ALS抑制剂类除草剂菵草的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液中的至少一种。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。

5.抗ALS抑制剂类除草剂菵草的PCR检测方法，其特征在于，利用权利要求1所述引物组合或权利要求2-4任一项所述试剂盒检测抗ALS抑制剂类除草剂菵草。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取样品中的DNA；

2)以步骤1)中提取的DNA为模板，进行PCR扩增反应；

3)分析PCR产物。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，PCR反应体系以20μl计为：

8.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，PCR反应条件为：94℃3分钟；94℃1分钟，56℃1分钟，72℃1分钟，共30个循环；72℃10分钟。