[发明专利]一种泥螺寡肽在抗前列腺癌中的应用有效
申请号: | 201410277152.6 | 申请日: | 2014-06-20 |
公开(公告)号: | CN105238833B | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 闻正顺;马剑茵;曹玉昊;林焕乐;胡俊峰 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋学院 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/17;A61P35/00 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠卫 |
地址: | 316022 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 寡肽 前列腺癌 中的 应用 | ||
1.一种泥螺寡肽在制备抗前列腺癌DU-145细胞药物中的应用,其特征在于:所述泥螺寡肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述,
上述泥螺寡肽通过以下步骤制得:新鲜泥螺洗净去壳,取泥螺组织捣碎,加入蒸馏水匀浆,料液比为1:(3~4),用盐酸溶液和氢氧化钠溶液将匀浆液的pH值调节为8~9,加入0.4~0.5%匀浆液体积的胰蛋白酶, 40~50℃保温水解7~9h,水解完成后95~100 ℃、10~15min 进行灭酶,4℃下水解液于 9500~10000 r/min 离心 15~20min ,取上清液,经3kd超滤膜超滤获得分子量小于3kd的第一组分,将该第一组分经凝胶层析洗脱获得第二组分,最后将该第二组分反相高效液相色谱分离获得所述泥螺寡肽,
所述凝胶层析条件如下:所述第一组分的浓度为48~50mg/mL、上样量为3~4mL、速度为2.5~3.5ml/min,流动相为超纯水,280nm紫外检测,
所述反相高效液相条件如下:选用Zorbax SB-C18,4.6×250,5um;柱温为20℃;流动相为1%TFA和乙腈;梯度洗脱:从开始到30min结束,乙腈浓度从0变化到40%,洗脱速度为1.0mL/min;进样体积为50ul紫外检测波长分别为214nm、280nm。
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