[发明专利]一种泥螺寡肽在抗前列腺癌中的应用

说明书

本发明涉及一种泥螺寡肽在抗前列腺癌中的应用，尤其涉及该泥螺寡肽在抗前列腺癌DH‑145肿瘤细胞药物中的应用。该泥螺寡肽的氨基酸序列为Gln‑Pro‑Pro‑Gly‑Leu，以泥螺为原料，通过胰蛋白酶酶解泥螺组织，结合凝胶层析和高效液相色谱分离纯化获得。本发明中的泥螺寡糖可对前列腺癌DH‑145肿瘤细胞显著抑制，其中对DH‑145细胞的增殖抑制率可达33.5～88.4％，对前列腺癌DH‑145细胞的早期凋亡和晚期凋亡的影响率分别为20～22.27％和28～30.66％，可见具有显著地抗肿瘤活性。泥螺寡肽具有良好的开发前景，对泥螺寡糖的抗前列腺癌DH‑145肿瘤细胞的研究可为抗前列腺癌药物的开发研究提供理论支持。

技术领域

本发明涉及泥螺酶解寡肽的应用，具体涉及一种泥螺寡肽在抗前列腺癌药物中的应用。

背景技术

泥螺(Bullacta exarata)，俗称“吐铁”、“黄泥螺”、“梅螺”等，属软体动物门、腹足纲、后鳃亚纲、头楯目、阿地螺科、泥螺属，为太平洋西岸海水及咸淡水特产的种类，由贝壳和软体两部分组成，含有丰富的蛋白质、钙、磷、铁和维生素等成分，寡肽物质丰富，在我国广泛分布于东海和黄海两侧的长江，是一种常见的水产品。

恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康和生命的疾病，发病率越来越高，目前已有的化疗药物虽对大多数肿瘤有一定的疗效，但选择性差、毒副反应大、耐药性等问题依然非常明显。因此，寻找高效、低毒、特异强的抗肿瘤药物仍势在必行。寡肽因其分子量小、无免疫原性、活性高、副作用小，尤其是对多药抗性的肿瘤细胞系也有很好的抑制活性。海洋生物寡肽是目前海洋生物活性物质研究的一个重要领域，一些生物活性寡肽常以非活性状态存在于蛋白质中，这些蛋白质经过蛋白酶的水解作用，使得隐藏于其中的活性肽释放出来，有可能发挥出比蛋白质更多的生物活性。例如：如邓伟等发现藻蓝蛋白酶解寡肽对人宫颈癌HeLa细胞株的体外生长有明显的抑制作用；杨永芳等酶解紫贻贝所得的紫贻贝寡肽对前列腺癌PC-3细胞和DU-145细胞有特异性的增殖抑制作用，并且对DU-145细胞的抑制作用强于对PC-3细胞的增殖抑制作用；姚如永等研究泥蚶寡肽在0.25-1.0g·L^-1范围内，寡肽能明显的抑制肺癌细胞A549和Ketr-3细胞的增殖，同时还能抑制细胞蛋白质的合成，并呈明显的剂量依赖性。

前列腺癌为男性高发的恶性肿瘤，其死亡率高居癌症死亡率的第二位，仅次于肺癌。近年来，随着人们生活方式的改变、人口的老龄化以及诊断水平的不断提升，我过前列腺癌的发病率明显呈上升趋势。前列腺癌DU-145细胞是从前列腺癌脑转移肿瘤中分离出来的，分化程度低，为雄激素依赖的前列腺癌细胞，具有强大的转移潜能，缺乏内源性的雄激素受体的表达。DU-145细胞完全贴壁的时间通常为24h内，具有较强的侵袭和促血管新生能力。研究泥螺酶解寡肽多前列腺癌DU-145细胞的抑制作用，对前列腺癌药物的理论研究具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是在酶解泥螺组织获取泥螺寡肽的基础上，提供一种泥螺寡肽在抗前列腺癌药物中的应用，尤其是抗前列腺癌DU-145肿瘤细胞。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种泥螺寡肽在抗前列腺癌DU-145细胞药物中的应用，其特征在于：所述泥螺寡肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述，其中药物的具体实现形态可为片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂等。

上述泥螺寡肽通过以下步骤制得：新鲜泥螺洗净去壳，取泥螺组织捣碎匀浆，用盐酸溶液和氢氧化钠溶液将匀浆液的pH值调节为8～9，料液比为1：(3.8～4)加入0.4～0.5％匀浆液体积的胰蛋白酶，40～50℃保温水解7～9h，水解完成后95～100℃、10～15min进行灭酶，4℃下水解液于9500～10000r/min离心15～20min，取上清液，经3kd超滤膜超滤获得分子量小于3kd的第一组分，将该第一组分经凝胶层析洗脱获得第二组分，最后将该第二组分反相高效液相色谱分离获得所述泥螺寡肽。