[发明专利]一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针法有效
申请号: | 201410281898.4 | 申请日: | 2014-06-23 |
公开(公告)号: | CN104017893A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 王伟;王子剑;马丽红 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 诊断 hiv 口腔癌 感染 毛细管 电泳 分离 dna 探针 | ||
1.一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针,其特征在于:所述的DNA探针序列为:5’-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’和5’-GGAGAAGTTTTTGAAGACGGCTGA-3’。
2.根据权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针,其特征在于:所述探针上面标记上羧基荧光素,使之具有荧光信号。
3.一种如权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
(1)样品处理:用棉签从人体口腔内无痛刮取粘膜细胞,置于试管,加入水,反复挤压棉团让细胞脱落,离心,去除上清液加TE溶液,煮沸,冰浴后,震荡离心,取上清液进行PCR扩增特定的DNA片段;
(2)设计两段分别与步骤(1)已知的HIV和口腔癌DNA片段互补的DNA,在这两段DNA上面标记上羧基荧光素使之具有荧光信号,这两段DNA为HIV和口腔癌的DNA探针;
(3)采用毛细管胶束电动色谱法,首先对所述DNA探针进行分离,经过条件优化以后,两条HIV和口腔癌的探针峰得到分离;若同时感染这两种疾病,当把探针加入经过以上处理过的样品中以后,HIV及口腔癌的DNA探针就会特异性地和PCR扩增后HIV及口腔癌的DNA互补片段产生杂化并生成双链DNA,这样溶液中就多了两个会发光的样品,通过色谱图,根据后面出现的双链杂化峰判定是否有感染。
4.根据权利要求3所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针的方法,其特征在于:步骤(1)中扩增的片段序列必须要包含HIV和口腔癌的DNA片段各一种;且所述的HIV和口腔癌的DNA片段的序列分别为:5’-ATGTGGAAAATCTCTAGCAGT-3’和5’-TCAGCCGTCTTCAAAAACTTCTCC-3’。
5.一种如权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针用于同时诊断HIV和口腔癌感染上的应用。
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