[发明专利]一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针法有效

专利信息
申请号: 201410281898.4 申请日: 2014-06-23
公开(公告)号: CN104017893A 公开(公告)日: 2014-09-03
发明(设计)人: 王伟;王子剑;马丽红 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 蔡学俊
地址: 350108 福建省福州市*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 同时 诊断 hiv 口腔癌 感染 毛细管 电泳 分离 dna 探针
【权利要求书】:

1.一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针,其特征在于:所述的DNA探针序列为:5’-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’和5’-GGAGAAGTTTTTGAAGACGGCTGA-3’。

2.根据权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针,其特征在于:所述探针上面标记上羧基荧光素,使之具有荧光信号。

3.一种如权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:

(1)样品处理:用棉签从人体口腔内无痛刮取粘膜细胞,置于试管,加入水,反复挤压棉团让细胞脱落,离心,去除上清液加TE溶液,煮沸,冰浴后,震荡离心,取上清液进行PCR扩增特定的DNA片段;

(2)设计两段分别与步骤(1)已知的HIV和口腔癌DNA片段互补的DNA,在这两段DNA上面标记上羧基荧光素使之具有荧光信号,这两段DNA为HIV和口腔癌的DNA探针;

(3)采用毛细管胶束电动色谱法,首先对所述DNA探针进行分离,经过条件优化以后,两条HIV和口腔癌的探针峰得到分离;若同时感染这两种疾病,当把探针加入经过以上处理过的样品中以后,HIV及口腔癌的DNA探针就会特异性地和PCR扩增后HIV及口腔癌的DNA互补片段产生杂化并生成双链DNA,这样溶液中就多了两个会发光的样品,通过色谱图,根据后面出现的双链杂化峰判定是否有感染。

4.根据权利要求3所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针的方法,其特征在于:步骤(1)中扩增的片段序列必须要包含HIV和口腔癌的DNA片段各一种;且所述的HIV和口腔癌的DNA片段的序列分别为:5’-ATGTGGAAAATCTCTAGCAGT-3’和5’-TCAGCCGTCTTCAAAAACTTCTCC-3’。

5.一种如权利要求1所述的一种同时诊断HIV和口腔癌感染的毛细管电泳分离DNA探针用于同时诊断HIV和口腔癌感染上的应用。

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