[发明专利]离心沉降辅助植物转基因的方法有效
申请号: | 201410283216.3 | 申请日: | 2014-06-23 |
公开(公告)号: | CN104017825B | 公开(公告)日: | 2016-11-23 |
发明(设计)人: | 王贵荣;李斌连;唐克轩 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 杨元焱 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 离心 沉降 辅助 植物 转基因 方法 | ||
1.一种离心沉降辅助植物转基因的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,通过植物组织培养技术,得到无菌的植物材料;
步骤二,从获得的无菌植物材料中切取受体部位,作为植物受体材料;
步骤三,将包含有目的基因的农杆菌活化到转化状态后,在5000-10000rpm条件下离心并重悬,得到农杆菌重悬液;
步骤四,把植物受体材料浸泡到农杆菌重悬液中,再次进行离心处理;
步骤五,将步骤四中离心处理后的材料转移到无菌玻璃器皿中静置15-20分钟;
步骤六,静置时间结束后,把感染后的植物材料从玻璃器皿中取出来,用无菌滤纸吸干残留的菌液,然后转移到共培养基中共培养;
步骤七,共培养结束后,将感染过的植物受体材料在选择压力下进行筛选,最终获得阳性转化子。
2.根据权利要求1所述的离心沉降辅助植物转基因的方法,其特征是:步骤四中所述的离心处理是,在25℃下,5000-8000rpm离心5-10min。
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