[发明专利]一种通过调控gln1基因表达提高S‑腺苷甲硫氨酸产量的方法有效

专利信息
申请号: 201410294493.4 申请日: 2014-06-26
公开(公告)号: CN104017843B 公开(公告)日: 2017-02-15
发明(设计)人: 钱江潮;陆俊杰;乔雪锋;武晓乐;秦秀林;储炬;庄英萍;张嗣良 申请(专利权)人: 华东理工大学
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N1/19;C12P19/40;C12R1/84
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司31100 代理人: 陈静
地址: 200237 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 通过 调控 gln1 基因 表达 提高 腺苷 甲硫氨酸 产量 方法
【权利要求书】:

1.一种生产S-腺苷甲硫氨酸的方法,其特征在于,所述方法包括:

(1)在S-腺苷甲硫氨酸生产菌株的基因组中引入外源的谷氨酰胺合成酶表达盒;

(2)培养步骤(1)制备的菌株,从而生产S-腺苷甲硫氨酸。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的谷氨酰胺合成酶表达盒包括以下操作性连接的元件:AOX1启动子、编码谷氨酰胺合成酶的基因、转录终止序列。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的在S-腺苷甲硫氨酸生产菌株是插入了SAM合成酶基因ds16,并弱化了β-胱硫醚合成酶基因的菌株。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,培养的方法包括:30±2℃、220±50rpm条件下进行诱导培养;每隔12±2h补入甲醇至其终浓度为按照体积1.2±0.2%;每隔24±4h补加L-Met,共诱导96±12h。

5.一种改良的S-腺苷甲硫氨酸生产菌株,其特征在于,所述的菌株的基因组中引入了外源的谷氨酰胺合成酶表达盒。

6.如权利要求5所述的菌株,其特征在于,所述的谷氨酰胺合成酶表达盒插入到S-腺苷甲硫氨酸生产菌株基因组的一号染色体的第1754722-1756086位碱基处。

7.如权利要求5所述的菌株,其特征在于,所述的谷氨酰胺合成酶表达盒包括以下操作性连接的元件:

AOX1启动子、编码谷氨酰胺合成酶的基因,转录终止序列。

8.如权利要求5所述的菌株,其特征在于,所述的改良的S-腺苷甲硫氨酸生产菌株是插入了SAM合成酶基因ds16,并弱化了β-胱硫醚合成酶基因表达的菌株。

9.谷氨酰胺合成酶的用途,其特征在于,用于促进S-腺苷甲硫氨酸生产菌株生产S-腺苷甲硫氨酸。

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