[发明专利]母乳脂肪酸谱数据库的建立方法有效
申请号: | 201410298636.9 | 申请日: | 2014-06-27 |
公开(公告)号: | CN104165955A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
发明(设计)人: | 李铎;吴珂剑;谢宏;俞祖勋;任一平;赵逸民 | 申请(专利权)人: | 浙江大学;贝因美婴童食品股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 母乳 脂肪酸 数据库 建立 方法 | ||
1.一种母乳脂肪酸谱数据库的建立方法,包括以下步骤:
(1)取多个母乳样品;
(2)将每个母乳样品与甲醇进行酯化反应,反应完成后,将反应液离心,取上层有机相;
(3)将所述有机相注入SPE固相萃取小柱,用洗脱液淋洗SPE固相萃取小柱,收集流出液,N2吹干,获得纯化的脂肪酸甲酯;
(4)利用气相色谱采集脂肪酸甲酯图谱,采用归一法计算得到母乳样品中各类脂肪酸的含量;
(5)建立母乳脂肪酸谱数据库。
2.如权利要求1所述的建立方法,其特征在于,所述酯化反应包括:将母乳样品、甲醇/苯溶液混合均匀,加入乙酰氯,水浴加热反应,反应完成后加入可溶性碳酸盐,中和混合液。
3.如权利要求2所述的建立方法,其特征在于,所述母乳样品、甲醇、苯和乙酰氯的体积比为:1∶16∶4∶2。
4.如权利要求2所述的建立方法,其特征在于,所述水浴加热反应的温度为80~100℃,时间为1~2小时。
5.如权利要求1所述的建立方法,其特征在于,所述SPE固相萃取小柱为聚酰胺柱,柱容量为500mg。
6.如权利要求1所述的建立方法,其特征在于,所述洗脱液为乙醚-正己烷。
7.如权利要求1所述的建立方法,其特征在于,所述气相色谱采用安捷伦DB-23色谱柱。
8.如权利要求1所述的建立方法,其特征在于,所述气相色谱采集脂肪酸甲酯图谱的分析条件为:进样口温度:270℃;进样体积:2μL;检测器温度:270℃;载气:N2,流速:2.30mL/min,气体配比:氮气∶氢气∶空气为20∶7∶5;柱温:140℃,柱温升温程序:140℃,保持2min,以10℃/min升至160℃,保持2min;以10℃/min升至220℃,保持4min;以10℃/min升至240℃,保持6min。
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