[发明专利]一种用于评价三七抗凝活性的生物效价检定方法

说明书

技术领域

本申请涉及一种用于评价三七抗凝活性的生物效价检定方法。

背景技术

三七是一种常用的中药，其法定来源为五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根茎。又名为田七、山漆、金不换等。支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”[5]。三七始载于《本草纲目》，距今已有400多年的用药史。在国内外久负盛名，有“止血神药”的美称[12-14]。其性甘、微苦、温；归肝、胃经。具有散瘀止血、消肿定痛的功效。临床上多用于活血、止血。

《中国药典》2010年版，在三七药材项下主要收载性状、显微和薄层鉴别等，难以全面评价三七药材品质，而建立适宜的活血化瘀生物活性检测方法用于三七质量控制和品质评价，可以体现三七药材功效特点，补充和完善现有的三七药材质控模式的不足。

将生物活性测定法引入中药质量控制和评价体现，不仅可以鉴定中药品种和质量，而且可以评价药效，尤其对于三七等化学成分复杂、理化方法不能表征其含量及理化测定不能反映生物活性和临床疗效的中药而言，此方法对于不能反映生物活性和临床疗效的中药而言，更能凸显其优越性。

生物评价因具有药效相关、整体可控等技术优势，作为符合中医药特点的质量标准控制模式及方法，已成为中药质量标准化的重要发展方向之一。中药受品种、产地、加工方法等诸多因素的影响，造成了中药质量的物质基础变化大、质量难以控制的现象，并且其成分复杂、药理作用多样，仅控制少数成分不足以确保药材或制剂的质量，无法担任控制质量或反映疗效的重任。因此，本申请试图通过建立基于生物评价的中药质量研究的方法，完善现有的质量控制标准，使临床用药更为安全有效。

参考文献

[1]周应群,陈士林,张本刚,等.基于遥感技术的三七资源调查方法研究[J].中国中药杂志,2006,30(24):1902-1905.

[2]王炳艳,韦美丽,陈中坚,等.文山三七产区土壤养分测试与分析[J].人参研究,2006,18(3):35-37.

[3]冯光泉,孙玉琴,崔秀明,等.有机三七基地选址标准操作规程[J].现代中药研究与实践,2012,2001.

[4]崔秀明,徐珞珊,王强,等.云南三七道地产区地质背景及土壤理化状况分析[J].中国中药杂志,2005,30(5):332-335.

[5]金航,崔秀明,陈中坚,等.三七栽培土壤地质背景分区特征[J].云南大学学报(自然科学版),2009,31440-445.

[6]简在友,王文全,游佩进.三七连作土壤元素含量分析[J].中国现代中药,2009,11(4):10-11.

[7]刘莉,赵安洁,杨雁,等.三七不同间隔年限种植土壤的理化性状比较分析[J].西南农业学报,2013,26(5):1946-1952.

发明内容

本申请的目的是提供一种用于评价三七抗凝活性的生物效价检定方法。

中药质量生物评价方法不等同于一般的药理学实验方法，其同时具备定量药理学与药检分析的双重属性和要求。本申请意在用生物效价检测方法来评价三七药材的品质，从而为其质量控制提供参考依据。一般来说，药理学实验方法主要是重现其趋势和规律，重在证实试验结果与对照组比较是否有统计学意义；因此，三七抗凝指标检测结果主要是重现其抗凝活性的趋势和规律，不一定要重现实验数据的绝对值，重在证实实验结果与对照组比较是否具有显著性差异及统计学意义；而药检分析则要求重现试验数据的绝对值，但允许有一定的误差范围，因此抗凝活性效价的检定与化学成分分析方法相比，可从整体上对三七药材的质量进行评价。此外，生物检定重在评价活性作用大小，而不是要求证某一药物是否具有某种药理作用，更不是要求证其是通过什么药理机制而发生作用的。

具体地，本申请提供一种用于评价三七抗凝活性的生物效价检定方法，所述生物效价检定方法包括以下步骤：

a.配制供试品溶液和供试品稀释液

制备三七药材样品的干浸膏；

在测定前，用生理盐水将所述干浸膏配置成供试品溶液，过滤除菌，贮存，优选地在4℃下进行贮存，备用；

测定时，估计供试品抗凝效价，用所述生理盐水稀释所述供试品溶液，得到不同浓度的供试品稀释液；

b.配制对照品溶液和对照品稀释液

用所述生理盐水将阿司匹林配制成对照品溶液，过滤除菌，贮存，优选地在4℃下进行贮存，备用；

测定时，用所述生理盐水稀释所述对照品溶液，得到不同浓度的对照品稀释液；

c.测试