[发明专利]杂色曲霉SD-3及其在制备甲壳素脱乙酰酶中的应用有效
申请号: | 201410305365.5 | 申请日: | 2014-06-30 |
公开(公告)号: | CN104109636A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 陈虹;张建芬;柯薇;活泼 | 申请(专利权)人: | 浙江树人大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/80;C12R1/66 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310015 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杂色 曲霉 sd 及其 制备 甲壳素 乙酰 中的 应用 | ||
1.杂色曲霉(Aspergillus versicolor)SD-3,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国,武汉,武汉大学,430072,保藏编号:CCTCC NO:M 2013328;保藏日期:2013年7月11日。
2.一种权利要求1所述杂色曲霉SD-3在微生物发酵制备甲壳素脱乙酰酶中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述应用为:将杂色曲霉SD-3菌种孢子或经过扩大培养的种子液接种至产酶培养基中,28~32℃培养3~5天,获得发酵液,将发酵液经过离心或过滤除去菌丝体,所得上清液或滤液即为甲壳素脱乙酰酶粗酶液,将粗酶液分离提取,获得甲壳素脱乙酰酶;所述产酶培养基终浓度组成为:蔗糖5~10g/L,酵母浸出粉2~6g/L,(NH4)2SO42~4g/L,K2HPO41~2g/L,KH2PO41~2g/L,乙酸钠1~3g/L,玉米浆4~6mL/L,溶剂为自来水,pH5.0~6.0。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述杂色曲霉SD-3菌种孢子按如下方法制备:将杂色曲霉SD-3接种于斜面或平板培养基,于28~32℃培养2~3天,得到杂色曲霉SD-3菌种孢子;所述每升斜面或平板培养基组成为:马铃薯150~200g、蔗糖10~20g、琼脂15~20g,自来水补足至1000mL,pH5.0~6.0。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述杂色曲霉SD-3种子液按如下步骤制备:(1)将杂色曲霉SD-3接种于斜面或平板培养基,于28~32℃培养2~3天,得到杂色曲霉SD-3菌种孢子;所述每升斜面或平板培养基组成为:马铃薯150~200g、蔗糖10~20g、琼脂15~20g,自来水补足至1000mL,pH5.0~6.0;(2)将步骤(1)杂色曲霉SD-3菌种孢子接种至种子培养基中,于28~32℃、150~250r/min振荡条件下培养2~3天,得到种子液;所述每升种子培养基组成为:蔗糖5~10g,酵母浸出粉2~6g,(NH4)2SO42~4g,K2HPO41~2g,KH2PO41~2g,乙酸钠1~3g,玉米浆4~6mL,加自来水至1000mL,pH4.5~6.5。
6.如权利要求3或5所述的应用,其特征在于所述种子液的体积接种量为5~10%。
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