[发明专利]一种分离和测定泊马度胺中间体有关物质的液相色谱法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，一种分离和测定泊马度胺中间体有关物质的液相色谱法。

背景技术

泊马度胺(pomalidomide)是美国Celgene制药公司开发的新型免疫调节剂，商品名为Pomalyst。2013年2月8日，美国食品和药品监督管理局(FDA)批准该药由于治疗复发性及难治性多发性骨髓瘤。

泊马度胺中间体化学名为3-氨基邻苯二甲酸,分子式为C₈H₇NO₄，其结构式为：

在合成该化合物的过程中，有几步重要的杂质可能由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，对于泊马度胺中间体的合成主要控制的有关物质有3个，分别是有关物质1：3-aminophthalicanhydride、有关物质2:4-amino-2-(1,3-dioxo-1,3-dihydroisobenzofuran-4-yl)isoindoline-1,3-dione、有关物质3:3-(4-amino-1,3-dioxoisoindolin-2-yl)phthalicacid，结构分别如下图由左至右所示：

有关物质1(Impurity1)

有关物质2(Impurity2)

有关物质3(Impurity3)

对于合成泊马度胺中间体引入的杂质在原料中是需要进行质量控制的，因此，实现泊马度胺中间体及其有关物质的分离，在泊马度胺的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析泊马度胺中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现泊马度胺中间体与其有关物质的分离和测定，保证泊马度胺及含泊马度胺制剂的质量控制。

本发明的技术方案为：

一种液相色谱法分离测定泊马度胺中间体有关物质的方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液和对照品溶液的制备；

(2)通过高效液相色谱测定检测所述供试品溶液和对照品溶液；

其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶(250×4.0mm，5μm)为填充剂，以10：90(v/v)的乙腈/磷酸缓冲液pH＝2.6为流动相A,以90:10(v/v)的乙腈/磷酸缓冲液pH＝2.6为流动相B，梯度洗脱，柱温为25～40℃，优选30℃，流速为0.8～1.2ml/min，优选1.0mL/min，检测波长为254nm。

进一步地，所述供试品溶液和对照品溶液的制备包括：取泊马度胺中间体待测样品，加溶剂制成浓度为1mg/ml的溶液，作为供试品溶液；量取所述供试品溶液，加溶剂制成浓度为0.01mg/ml的溶液，作为对照溶液。

进一步地，所述溶剂为体积比为50：50的所述流动相A和流动相B。

进一步地，所述梯度洗脱的条件为：以体积比计，0分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％；5分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％；35分钟时，流动相A为20％，流动相B为80％；36分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％；40分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％。

进一步地，所述色谱柱为Kormasil色谱柱。

本发明还进一步提供了所述方法在监控泊马度胺或含泊马度胺制剂的质量中的用途。

附图说明

图1是泊马度胺中间体样品的色谱图。

其中，保留时间为2.319的色谱峰为有关物质1(Impurity1)、保留时间为15.873有关物质2(Impurity2)及保留时间为16.358的色谱峰为有关物质3(Impurity3)。

具体实施方式

通过以下实施例可以进一步理解本发明的优点和特点，不应该理解为是对本发明范围的限制。

以下实施例中所用仪器和试剂，除特殊说明以外均为普通市售。

仪器与试剂

仪器：Agilent1260series高效液相色谱仪。

色谱柱：C18(Kromasil250*4.6mm5μm)。

供试品：深圳海王药业有限公司生产的泊马度胺中间体(合成路线：3-硝基邻苯二甲酸经钯碳加氢还原得3-氨基邻苯二甲酸，再与3-氨基-2，6-哌啶二酮缩合得到泊马度胺)。

试剂：色谱级乙腈(Merck公司)，磷酸(分析纯)。

溶剂：体积为(50：50v/v)的流动相A和流动相B。