[发明专利]一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法

权利要求书

1.一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：将蟾酥细粉加入乙醇水溶液，超声提取后，冷却、摇匀；离心，吸取上清液加热蒸干，加入溶剂溶解并定容，过滤膜，取续滤液作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：将5-羟色胺和蟾毒色胺对照品加入溶剂溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液；

3)定性检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间，确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分；

4)定量检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，根据色谱峰面积，采用外标法确定供试品溶液中2种吲哚类生物碱成分的含量。

2.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述加入的乙醇水溶液为50％乙醇水溶液，为蟾酥细粉的100-800倍量；所述超声提取时间为20-60min。

3.根据权利要求2所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述加入的50％乙醇为蟾酥细粉的200倍量；所述超声提取时间为20min。

4.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述离心时间为20min；所述离心转速为4000rpm。

5.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述蟾酥细粉加入乙醇水溶液后，需精密称重；所述超声提取、冷却后，需再称重，并用50％乙醇水溶液补足失重。

6.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：5-羟色胺120.0-1800.0μg/ml、蟾毒色胺14.4-216.0μg/ml。

7.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述步骤1)或2)中，所述溶解并定容时使用的溶剂为20％乙醇水溶液。

8.根据权利要求1所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：Alltima C₁₈色谱柱；柱温：25-35℃；检测波长：275nm；流速：0.7-0.8ml/min；进样量：10μl；流动相：乙腈-0.5％磷酸二氢钾缓冲溶液、磷酸调缓冲溶液pH至3.2，其中，A相为乙腈，B相为0.5％磷酸二氢钾水溶液；分析时间：25min；等度洗脱。

9.根据权利要求8所述的一种蟾酥药材中吲哚类生物碱成分的检测方法，其特征在于，所述等度洗脱在0-25min，以流动相A相：B相体积比为5：95进行洗脱。