[发明专利]液相色谱法分离分析琥珀酸索利那新中间体及其有关物质

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种液相色谱法分离分析琥珀酸索利那新中间体及其有关物质的方法。 

背景技术

琥珀酸索利那新用于膀胱过度活动症患者伴有的尿失禁或尿频。琥珀酸索利那新中间体英文化学名为（S）-4-nitrophenyl1-phrnyl-3,4-dihydroisoquinoline-2(1H)-carboxylate，分子式为C₂₂H₁₈N₂O₄。琥珀酸索利那新中间体结构式为： 

                                                    

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，对于琥珀酸索利那新中间体的合成主要控制的有关物质有3个，分别是有关物质1（1-Phenyl-1,2,3,4-tetrahydro-isoquinoline）、有关物质2（4-Nitro-phenol）和有关物质3（Carbonic acid bis-(4-nitro-phenyl) ester），结构式分别为：

     

有关物质1                  有关物质2                      有关物质3

对于合成琥珀酸索利那新中间体中引入的杂质，在原料药中是需要进行质量控制的，因此，实现琥珀酸索利那新中间体及其有关物质的分离分析，在琥珀酸索利那新的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析琥珀酸索利那新中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现琥珀酸索利那新中间体与其有关物质的分离和测定，保证琥珀酸索利那新及含琥珀酸索利那新制剂的质量控制。 

本发明所述的用液相色谱法分析琥珀酸索利那新中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，是采用以辛烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的无机盐缓冲溶液－有机相为流动相。 

本发明采用Kromasil、Apollo 和Ultimate品牌的色谱柱，优选Apollo-C₈色谱柱。 

本发明所述的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选为乙腈。

本发明所述的流动相无机盐缓冲溶液-有机相采用梯度洗脱。 

本发明所述的无机盐缓冲溶液中包含的无机盐选自磷酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐，优选为磷酸盐，最优选为磷酸二氢钾。 

本发明所述的无机盐缓冲溶液中包含的无机盐的浓度为0.01～0.1mol/L，优选浓度为0.02mol/L。 

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现： 

1) 取琥珀酸索利那新中间体样品适量，用乙腈或流动相溶解样品，配制成每1mL含琥珀酸索利那新中间体及其有关物质0.1～1.5mg，优选为0.5 mg/mL的样品溶液；

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，优选为1.0mL/min，检测波长为205～280nm，优选为210nm，柱温箱温度为20～50℃，优选为25℃；

3) 取1)的样品溶液10～50μL，优选为10μL注入液相色谱仪，完成琥珀酸索利那新中间体及其有关物质的分离与分析。

本发明采用缓冲液的最优pH值为4.5。 

本发明使用的仪器与最优色谱条件为： 

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20AT， CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp 

色谱柱：C₈（Apollo，250×4.6 mm，5μm）

流动相： A：0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液（称取磷酸二氢钾2.72g，加水溶解至1000ml，用稀磷酸溶液调pH 4.5）；B：乙腈；采用梯度洗脱；

流速：1.0 mL/min

检测波长：210nm

柱温：25℃

进样体积：10μL。

本发明采用C₈（Apollo，250×4.6 mm，5μm），能够有效地分离分析琥珀酸索利那新中间体及其有关物质。本发明解决了琥珀酸索利那新及其有关物质的分离测定问题，从而确保了琥珀酸索利那新中间体原料药的质量可控（结果见附图1～7）。 

附图说明