[发明专利]一种检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子的方法

权利要求书

1.一种检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于所述方法的步骤如下：

步骤1：取水分含量为Wc的样品，粉碎，称量样品W₂为25g于500ml的三角瓶中，加入300mL去离子水，混匀；150rpm振荡1-2h，加水恒重至W₁为350g，滤纸过滤，过滤液检测比重S_G，浸出物Me；取过滤液10mL加入30mL无水乙醇，混匀；冰浴醇沉反应1h；反应后样品10000rpm离心10min，去除上清液，沉淀加入10mL去离子水混匀，85℃水浴2h进行溶解；溶解完毕后10000rpm进行离心去除沉淀，上清液冷冻保存，备用；

步骤2：绘制标准曲线，利用木糖与间苯三酚在酸性条件下的显色反应，形成红色物质，测定含量，计算公式如下：

Y＝a X₅₅₂+b

其中：X₅₅₂为552nm时样品吸光度；a为标准曲线的斜率；b为标准曲线的截距；Y为上清液中木糖浓度，mg/L；

G=Y/0.65×N(100-Me)×SG×W1-W2W2×100+Wc100-Wc×20]]>

其中：G为样品中水溶性木聚糖含量，mg/100g绝干麦芽；N为稀释倍数；Y为上清液中木糖浓度，mg/L；Wc为样品的水分，％；Me为麦芽汁的浸出物含量，g；S_G为麦芽汁的比重；W₁为样品麦汁重量，g；W₂为样品重量，g；0.65为木糖与木聚糖转换系数。

2.根据权利要求1所述的检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于步骤1所述的样品为大麦或麦芽。

3.根据权利要求1所述的检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于步骤1中冰浴醇沉反应过程中，每20分钟摇匀一次。

4.根据权利要求1所述的检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于步骤1中样品粉碎采用EBC粉碎机。

5.根据权利要求1所述的检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于步骤2中木糖标准曲线绘制方法为：500mg/L木糖标准溶液的配置：50mg木糖用去离子水定容至100mL；分别取出1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0mL所述木糖标准溶液，稀释至10mL，配制不同浓度的木糖标准溶液，分别取稀释后的标准溶液1mL，加入间苯三酚-冰醋酸反应液5mL后，混匀，沸水浴反应25分钟，冰浴终止反应；以水加反应液为对照，测定各浓度木糖在552nm吸光度值，根据已知的木糖浓度值，建立标准曲线。

6.根据权利要求1所述的检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子(PYF)的方法，其特征在于步骤2显色反应的步骤为：取3支具塞比色管并分别标识、编号；空白：于1号比色管中加1ml蒸馏水；样品：在2、3号比色管中加入1ml制备样品；在比色管中各加入间苯三酚-冰醋酸反应液5ml；立即将3只比色管放入沸水浴反应25分钟，冰浴终止反应；以空白调节仪器零点，于552nm波长下检测待测样品的吸光值。