[发明专利]一种重组人CYTL1蛋白的表达方法和用途在审
| 申请号： | 201410317157.7 | 申请日： | 2014-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN104087608A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 杨小红;李斯明;崔树良;梁伟国 | 申请（专利权）人： | 广州市红十字会医院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N5/077;C07K14/52 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;宋静娜 |
| 地址： | 510235 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 cytl1 蛋白 表达 方法 用途 | ||
1.一种重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述方法为将SEQID:NO.1进行原核表达。
2.根据权利要求1所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中PCR扩增引物是：
正向引物：5’-GAAAAGCTTCACACTCCCCCGACCTGCTACT-3’；
反向引物：5’-TATAGAATTCCTAGCGCTGACGATC-3’。
3.根据权利要求1所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中选用的双酶切位点分别为Xmn I和EcoR I酶切位点。
4.根据权利要求1所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中原核表达载体为pFL-B13cl。
5.根据权利要求1所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中宿主菌为E.coli BL21(Gold)(DE3)。
6.根据权利要求1所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中采用IPTG诱导表达，IPTG终浓度为0.05～0.1mM，培养温度为37℃。
7.根据权利要求4所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述原核表达中采用镍亲和层析法纯化重组人CYTL1蛋白。
8.根据权利要求7所述的重组人CYTL1蛋白的表达方法，其特征在于，所述镍亲和层析中洗脱缓冲液含250mM咪唑。
9.一种采用如权利要求1-8任一方法表达的重组人CYTL1蛋白。
10.一种如权利要求9所述的重组人CYTL1蛋白在制备促进软骨细胞增殖药物中的用途。
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