[发明专利]一种海洋中石油烃浓度的检测方法

权利要求书

1.一种海洋中石油烃浓度的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）将健康的可口革囊星虫分别与添加有不同已知浓度的石油烃和待测样品的培养液共培养一定时间；

检测不同培训条件下可口革囊星虫的体腔液细胞DNA损伤状况，根据已知石油烃的浓度确定DNA损伤状况与石油烃浓度之间的数值关系；     2）根据确定的数值关系计算待检样品中石油烃的浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述数值关系使用绘制标准曲线的方式来确定。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述培养液的配置步骤为：将原油和经过滤灭菌后的天然海水按比例混合，接着超声分散后静置，吸取下层水相作为母液，将母液冷冻保存，用石油烃母液加一定量的海水配制等体积的若干个梯度浓度的石油烃溶液，随后加等量的同一批海泥混匀。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述原油和经过滤灭菌后的天然海水的比例为1:10—1:8，所述超声分散时间为1h—1.5h，静置时间为4—5h，冷冻温度为3℃—4℃，所述梯度浓度个数为6—8个。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述培养方法为：将体重2~3g的可口革囊星虫，在装有湿海泥的塑料桶中养一周待其状态稳定，取健康的可口革囊星虫随机分组，每组20只分别放入所配制的石油烃培养液中培养7d~10d，试验期间水温稳定为20℃~25℃，并在实验的第0、1、2、4、7天，获取可口革囊星虫的体腔液细胞。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述DNA损伤状况的检测方法为单细胞凝胶电泳分析，其包括采用三层铺胶法制片、细胞裂解、解旋及电泳、中和、染色、镜检6个步骤。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述口革囊星虫体腔液细胞细胞DNA的损伤状况分析采用SPSS软件统计分析。