[发明专利]一种翅柄铁线蕨快速繁殖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物快速繁殖技术领域，尤其是翅柄铁线蕨快速繁殖技术领域。

背景技术

蕨类植物是介于苔藓植物和种子植物之间的一大类群植物，具有独特的生活史。全世界蕨类植物约有12000多种，我国是世界上蕨类植物资源最丰富的地区之一，约有2000余种。蕨类植物分布很广，从高山到海滨，从寒带到热带都有生长，生态类型也极其多样，主要为土生、石生或附生，少数为水生或沼生。

蕨类植物在经济有着一定的重要性，常常被用作药物、食物、指示植物、工农业的原料。

大多数蕨类植物具有较高的观赏价值，它们虽然没有鲜艳夺目的花与果实，然而它们以千姿百态奇特的叶形、叶姿和青翠碧绿的色彩，使人赏心悦目，在观赏植物中占有重要地位。

翅柄铁线蕨(学名：Adiantum subliferum(Wall.)ex Hook.)是蕨类植物，多年生草本。植株高约30厘米。根状茎短而直立，被棕褐色披针形鳞片。叶簇生；栗黑色，有光泽，叶片披针形，互生，顶生羽片为扇形，外缘具有3-6缺刻，基部楔形。叶脉多回二歧分叉，叶干后厚纸质，淡褐绿色，有光泽，能着地生根，行无性繁殖。孢子囊群每羽片3-7枚；囊群盖椭圆形或肾形，染色体2n＝120。生林下潮湿的地方；分布于中国、越南、印度、尼泊尔、印度尼西亚、菲律宾及非洲西部热带地区。

翅柄铁线蕨乌黑发亮的细长叶柄两侧,装点着浅绿色的翡翠膜带,宛若信鸽的双翼,翩然飞致,因此得名。丛生叶翠绿,由二排对开近半月状的羽片组成,羽片粉红色,十分艳丽。长大的叶自然分披,像少女的披肩长发,洋气洒脱,给人以美感,楚楚动人,别开生面。翠绿色的羽片,先端变窄,有时延长为鞭状,落地生根,根茎繁衍形成新植株。枝芳菲的翅柄铁线蕨,向四周平展的绿叶,簇拥着微红色的幼叶,酷似一丛待放的花朵,妩媚动人,供游人大饱眼富,使观者留恋往返。

目前，翅柄铁线蕨多采用孢子繁育来进行生产栽培，这繁育技术提高品种的纯度，保持了品种特性，但成活率较低及繁殖速度较慢，制约了翅柄铁线蕨产业的发展。而组织培养育苗技术既可以保持种的纯度和特性，也可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。

现有技术中尚无经愈伤组织途径获得翅柄铁线蕨再生植株的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种翅柄铁线蕨快速繁殖的方法，经愈伤组织途径获得翅柄铁线蕨丛生芽，诱导生根，可实现翅柄铁线蕨组培苗的大量快速繁殖。

为了解决上述技术问题，本发明提出下列技术方案：

一种翅柄铁线蕨快速繁殖的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：

1)外植体的选取：取2cm长的根状茎茎尖，去掉杂质及茎尖周围的绒毛等附属物；

2)外植体消毒：将上述茎尖放入盛有自来水的20-25KHz超声波清洗机中保持温度30-35℃处理30-45min，然后以自来水冲洗10-20min；随后在超净工作台上以70-75％的酒精消毒25-35秒，0.02％升汞溶液中处理5-7分钟，然后以无菌水冲洗4-5遍，置于无菌培养皿备用；

3)初始诱导培养：将灭菌后外植体两端各剪去2-3mm，茎尖按末端向下插入初始诱导培养基中培养，培养条件为光强1000-2500Lx、光周期5-8h/d,温度25℃±2℃；培养4-6d后将其中未污染的外植体茎尖转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12-18d至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为：MS+6-BA0.1-0.2mg/L+NAA0.01-0.02mg/L；

4)愈伤组织诱导：取初始诱导培养中的芽，放入愈伤组织诱导培养基中培养15-20d，条件为暗培养，温度20℃±2℃；所述愈伤组织培养基为：MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.02-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；

5)分化和增殖培养：将透明无色的愈伤组织块放入分化培养基中培养20-25d，增殖产生大量丛生苗，培养条件为光强1800-2500Lx、光周期8-10h/d,温度25℃±2℃；所述分化和增殖培养用培养基为：WPM+6-BA0.1-0.5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；

6)生根培养：将5)步骤中的丛生苗切割成单个，转移至生根培养基中培养15-20d后生根，培养条件为光强1800-2500Lx、光周期8-10h/d,温度25℃±2℃；所述生根用培养基为：1/2MS+IBA0.1-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；