[发明专利]一种来源于鸡肠道的雌马酚产生梭菌C1-6及应用

权利要求书

1.来源于鸡肠道的雌马酚产生梭菌(Clostridium sp.)C1-6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9123，保藏日期2014年5月4日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

2.一种权利要求1所述雌马酚产生梭菌C1-6在催化大豆素制备S-雌马酚中的应用，其特征在于所述的应用为：将雌马酚产生梭菌C1-6经扩大培养获得的种子液以体积浓度5％的接种量接种至含大豆素的BHI培养基，在厌氧条件下，37℃培养48h后，取培养液分离纯化，获得S-雌马酚；所述BHI培养基终浓度组成为：蛋白胨10g/L、脱水小牛脑浸粉12.5g/L、脱水牛心浸粉5.0g/L、氯化钠5.0g/L、葡萄糖2.0g/L、磷酸氢二钠2.5g/L，溶剂为水，pH值为7.0。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述大豆素的初始浓度为50μg/ml。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述反应液分离纯化的方法为：取1ml的培养液，8000r/min离心3分钟，获得上清a；取900μl上清a至另一干净的2ml EP管中，然后向管中加入900μl乙酸乙酯，充分混匀后静置5min，5000r/min离心5分钟，获得上清b和沉淀b；取900μl上清b至另一干净的2ml EP管中；取沉淀b加入等量的乙酸乙酯重复离心1次，获得上清c；将上清b和上清c混合在一起，移到2ml离心管中，45℃真空冷冻浓缩成粉末；加入200μl无水甲醇到该EP管溶解浓缩粉末，并经0.22μm聚偏氟乙稀微孔滤膜过滤，滤液即为S-雌马酚。

5.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述种子液按如下步骤制备：将雌马酚产生梭菌C1-6接种至梭菌液体培养基，37℃培养过夜，取培养液在8000转/分离心3分钟后，弃上清，沉淀用质量浓度20％的甘油水溶液制成菌悬液，将菌悬液在-80℃保存；将-80℃保存的菌悬液以体积浓度2％的接种量接种到梭菌液体培养基中，37℃、厌氧静置培养48h后，获得种子液；所述梭菌液体培养基终浓度组成为：牛肉浸膏10g/L、蛋白胨10g/L、葡萄糖5g/L、氯化钠5g/L、酵母提取物3g/L、醋酸钠3g/L、可溶性淀粉1g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L、琼脂0.5g/L，以蒸馏水为溶剂，pH值6.8±0.2。