[发明专利]一种CHO细胞无血清培养基及其制备方法在审
申请号: | 201410321893.X | 申请日: | 2014-07-08 |
公开(公告)号: | CN104073464A | 公开(公告)日: | 2014-10-01 |
发明(设计)人: | 张春颖 | 申请(专利权)人: | 西藏天虹科技股份有限责任公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 850000 西藏自*** | 国省代码: | 西藏;54 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 cho 细胞 血清 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种CHO细胞无血清培养基,其特征在于,包括下列重量份的组分:
氨基酸组合物 1300-2000;
维生素组合物 12-25;
无机盐组合物 10-15;
微量元素组合物 0.005-0.006;
无菌水 900-1100。
2.如权利要求1所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述氨基酸组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种:
丙氨酸7.35-31.5、精氨酸152.13-211.5、天冬酰胺40.26-250.48、半胱氨酸38.26-45.12、谷氨酸8.14-32.51、甘氨酸8.14-30.45、组氨酸30.48-105.98、异亮氨酸53.41-131.25、亮氨酸58.94-167.23、赖氨酸91.25-193.26、甲硫氨酸15.26-61.42、苯丙氨酸34.12-83.56、脯氨酸17.34-35.41、丝氨酸27.31-95.15、苏氨酸54.16-97.24、色氨酸8.27-52.41、酪氨酸57.21-145.13、缬氨酸53.25-118.31和谷氨酰胺583.41-1248.93;
其中所述氨基酸均为L-氨基酸。
3.如权利要求2所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述维生素组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种:
维生素B6 0.01-0.2、维生素B12 0.02-0.42、维生素C9-10、维生素E0.30-0.31、生物素0.4-1.21、氯化胆碱0.064-0.072、D-泛酸钙0.004-0.005、叶酸0.062-0.081、肌醇0.83-1.43、烟酰胺0.17-0.20、吡哆醇盐酸盐0.0015-0.0017、核黄素0.06-0.29、腐胺二酸盐0.00501-0.00503、氢化可的松0.0015-0.0018和吡哆醛.HCL1.01-9.48。
4.如权利要求3所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述无机盐组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种:
碳酸氢钠2440-2451、氯化钠6995.50-7031.20、氯化钾312.81-313.90、氯化镁29.65-30.42、硫酸镁48.85-49.21、一水磷酸二氢钠62.51-62.53、磷酸氢二钠71.03-72.15、硫酸锌0.431-0.445、氯化钙116.60-117.32、五水硫酸铜0.0014-0.0016和七水硫酸铁0.062-0.071。
5.如权利要求4所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述微量元素组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种:
硝酸银0.0001-0.0005、硫酸锰0.00008-0.0008、硅酸钠0.003-0.012、钼酸铵0.0019-0.018、钒酸铵0.00007-0.0007、氯化镍0.00003-0.00031、氯化锡0.00002-0.00023、亚硒酸钠0.00005-0.0005、六水氯化铝0.00001-0.0001、硫酸钡0.00001-0.0001、氯化铝0.00001-0.0001、硫代甘油0.00001-0.0001、四水氯化钛0.00001-0.0001和八水氯化氧锆0.00001-0.0001。
6.如权利要求5所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述培养基还包括1000-8000重量份的补充因子组合物,所述补充因子组合物由下列重量份的组分组成:
葡萄糖 1000-7300;
生物碱类物质组合物 17-50;
大分子糖类物质组合物 1-21;
激素类物质组合物 0.084-0.49;
脂肪酸类物质组合物 0.14-1.16。
7.如权利要求6所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述补充因子组合物中的生物碱类物质组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种:腺嘌呤2.43-9.89、次黄嘌呤2.13-8.56、鸟嘌呤3.85-8.16、尿嘌呤4.37-10.00、胸腺嘌呤0.21-2.37、胞嘧啶4.85-10.00、乙醇胺1.24-12.34和腐胺0.080-0.832。
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