[发明专利]一种通城虎茎段的繁殖方法

权利要求书

1.一种通城虎茎段的繁殖方法，其特征在于，包括：

步骤(1)、制作通城虎外植体；

步骤(2)、利用诱导培养基培养外植体，待外植体萌发后获得试管苗，诱导培养基中含0.5-2.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤；

步骤(3)、利用增殖培养基培养试管苗，得到试管苗丛生芽，增殖培养基中含0.5-1.0mg/L的激动素、0-0.2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0-0.2mg/L的吲哚丁酸；

步骤(4)、利用壮苗培养基培养试管苗丛生芽，得到健壮试管苗，壮苗培养基中含0.2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.3-0.5mg/L的吲哚丁酸；

步骤(5)、利用生根培养基培养健壮试管苗，得到带根的试管苗，试管苗根长2-4cm，生根培养基中含0.5mg/L的吲哚丁酸和0-1.0mg/L的萘乙酸；

步骤(6)、炼苗，移栽至基质中培养。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，诱导培养基中含1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤；所述步骤(3)中，增殖培养基中含0.5mg/L的激动素、0.2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.2mg/L的吲哚丁酸；所述步骤(4)中，壮苗培养基中含0.2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.5mg/L的吲哚丁酸；所述步骤(5)中，生根培养基中含0.5mg/L的吲哚丁酸和0.6mg/L的萘乙酸。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中，基质由腐殖土、蛭石和椰糠按照体积比3∶1∶1混合组成。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，诱导培养基、增殖培养基和壮苗培养基均采用MS培养基，生根培养基采用1/2MS培养基，诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均含有4.5g/L的琼脂和25g/L蔗糖，pH值均为5.8。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，选取通城虎植株上带顶芽的嫩茎段或带一个腋芽的嫩茎段作为外植体。

6.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，对外植体进行消毒，具体消毒的过程为：用体积浓度为1％的洗洁精水溶液浸泡5-10min，自来水冲洗15-30min，无菌水润洗一次，然后用体积浓度为75％的酒精浸泡30-50s，再用添加了2-3滴吐温-20的质量浓度为0.1％的升汞溶液消毒6-8min，最后用无菌水冲洗3-5次。

7.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，培养温度为24-26℃，光照强度为1500lux，光照时间为10-12小时/天，培养30天；所述步骤(3)中，培养温度为24-26℃，光照强度为2000lux，光照时间为10-12小时/天，培养30天；所述步骤(4)中，培养温度为24-26℃，光照强度为2000lux，光照时间为10-12小时/天，培养21天；所述步骤(5)中，培养温度为24-26℃，光照强度为2000lux，光照时间为10-12小时/天，培养21天。

8.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中炼苗的具体过程为：将带根的试管苗连同培养瓶移出培养室，转入大棚，在温度为25-27℃的条件下放置7天，然后打开瓶盖，在瓶中加入自来水，炼苗3-4天。

9.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中，移栽后的培养过程具体为：移栽后7-10天使用塑料薄膜保湿，塑料薄膜上面再覆盖一层报纸，遮光率为60％-70％，空气湿度为85％-90％，每天喷雾1次。