[发明专利]一种白花杜鹃组织培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其是白花杜鹃组织培养技术领域。

背景技术

白花杜鹃(Rhododendron mucronatum(Bl.)G.Don)，为杜鹃花科植物，半常绿灌木，高1—3米；幼枝开展，分枝密，密被灰褐色开展的长柔毛，混生少数腺毛。幼枝、叶、花柄，子房被褐色粗伏毛或有腺毛。叶二型，叶椭圆形至椭圆状披针形，长3—5厘米，宽1—2厘米，顶端钝而有小而短尖头，基部楔形；叶上表面深绿色，疏被灰褐色贴生长糙伏毛，混生短腺毛，中脉、侧脉及细脉在上面凹陷，在下面凸出或明显可见；叶柄长2-4毫米，密被灰褐色扁平长糙伏毛和短腺毛。花1—3朵，顶生，有芳香；萼片披针形，长约1.5厘米，有腺毛，宿存；花冠纯白色，有时有淡蔷薇色或有条纹，宽钟状或宽漏斗形，长3.5—5厘米，5裂，裂片卵状椭圆形；雄蕊10，有时8，近基部有腺毛。蒴果长约l厘米，短于花萼。花期4—5月。

本种分布于华东及日本，在日本经长期栽培后已部分引入中国；半常绿灌木。暖地为常绿。

白花杜鹃枝干优美，花期长，为优良的园林绿化植物。

白花杜鹃还具有较大的经济价值，常常被作为药物使用。

目前，白花杜鹃多采用嫁接繁育来进行生产栽培，这繁育技术提高品种的纯度，保持了品种特性，但成活率较低及繁殖速度较慢，制约了白花杜鹃产业的发展。而组织培养育苗技术既可以保持种的纯度和特性，也可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。

现有技术中，尚无白花杜鹃的组织培养方法的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种白花杜鹃组织培养的方法，可实现白花杜鹃快速大量繁殖。

为了解决上述技术问题，本发明提出下列技术方案：

一种白花杜鹃组织培养的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：

1)外植体的选取：取当年生直径2-5mm的白花杜鹃枝条为外植体，剪去叶片后剪成2-3cm的茎段；

2)外植体消毒：将上述茎段放入盛有自来水的20KHz超声波清洗机中保持温度30-35℃处理30-45min，然后以自来水冲洗10-20min；随后在超净工作台上以70-75％的酒精消毒25-35秒，0.1％升汞溶液中处理5-7分钟，然后以无菌水冲洗4-5遍，置于无菌培养皿备用；

3)初始诱导培养：将灭菌后外植体茎段各剪去2-3mm，茎段按末端向下插入初始诱导培养基中培养，培养条件为光强2500-3000Lx、光周期10-14h/d,温度25℃±2℃；培养6-8d后将其中未污染的外植体茎段转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12-18d至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为：MS+6-BA0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.3mg/L；

4)增殖培养：将步骤3)新芽剪下并转接到新芽伸长和增殖培养基中，培养条件为光强2500-3000Lx、光周期10h/d,温度25℃±2℃；培养20d后，至新芽长出并伸长到1cm以上；所述的培养基组成MS+6-BA0.4-0.6mg/L+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.8-1.2mg/L+KT0.8-1.2mg/L。

5)生根培养：将步骤4)的新芽剪下，转接到生根培养基中，培养条件为光强2500-3000Lx、光周期12h/d,温度25℃±2℃；培养15d后，生出新根；生根培养基的配方为1/2MS+IBA0.2-0.5mg/L+PVP5-10mg/L；

6)炼苗和移栽：将有生根的白花杜鹃幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗3-5d后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽装有河沙基质的苗床上，保持温度20-25℃，湿度70％-80％，适当遮荫即可；