[发明专利]半乳糖配体及其在肝靶向脂质体中的应用

权利要求书

1.一种半乳糖配体分子的合成方法，其特征在于该方法是在非水相中，分两步用生物酶催化酯化后，采用重结晶法和硅胶柱层析法纯化即得，方法主要包括两个步骤，分别是：

步骤(1)：固醇基连接碳桥步骤；将一定量的二乙烯酯、固醇在脱水有机溶剂中溶解后，加入适量酶催化剂，温度35℃～55℃，反应0～48h后，过滤，滤液浓缩挥去有机溶剂，浓缩液重结晶即得中间产物式II；反应式为：

其中n＝5-20；

其中ROH为固醇，R为固醇基，R选自以下5种基团的至少一种：

步骤(2)：半乳糖基连接碳桥步骤：将步骤1得到的中间产物式II与乳糖醇或半乳糖或乳糖R’OH在脱水有机溶剂中溶解后，加入适量的另一种酶催化剂和适量的分子筛，置于恒温20～60℃，反应0.5～48h，抽滤，滤液真空低温浓缩挥去有机溶剂，浓缩液层析纯化，得到半乳糖配体分子；反应式为：

其中R’OH为乳糖醇、半乳糖或乳糖，R’为半乳糖基，反应位点为C-6位，R’选自以下结构中的一种：

其中步骤(1)中所采用的酶催化剂为选自RCL、Chirazyme L-2脂肪酶、Chirazyme L-1脂肪酶及Lipase QLM中的一种，酶的用量为1～20mg/mL反应体系；步骤(2)中所采用的酶催化剂为南极假丝酵母脂肪酶B，或者其商品化固定酶Novozym 435；酶催化剂用量为：1～50mg/mL反应体系。

2.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(1)中，固醇与二乙烯酯的投料摩尔比为1∶1～20∶1。

3.如权利要求1或2所述的合成方法，其特征在于步骤(1)中，所述的脱水有机溶剂为异辛烷、正己烷、环己烷、石油醚、丙酮其中至少一种或任意几种的组合。

4.如权利要求3所述的合成方法，其特征在于步骤(2)中，步骤1得到的中间产物式II与R’OH的投料摩尔比为1∶1～20∶1。

5.一种含有如权利要求1-4所述的方法制得的半乳糖配体分子的肝靶向配体脂质体，其特征在于由权利要求1-4的合成方法制得的半乳糖配体分子与磷脂及胆固醇制成，胆固醇和磷脂的摩尔比为1∶1～10，半乳糖配体的摩尔含量为胆固醇和磷脂的总摩尔数的0.5～30％。