[发明专利]一种牛支原体抗体检测试剂及其制备方法有效
申请号: | 201410327648.X | 申请日: | 2014-07-10 |
公开(公告)号: | CN104062439A | 公开(公告)日: | 2014-09-24 |
发明(设计)人: | 储岳峰;逯忠新;简莹娜;赵萍;贺英;陈胜利;刘永生 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/531;C12N15/31;C12N15/70;C07K14/30 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种牛 支原体 抗体 检测 试剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种由混合均匀的1份牛支原体P48融合蛋白抗原和1份10%醛化-鞣酸化绵羊红细胞(v/v)构成。
2. 权利要求1所述的牛支原体抗体检测试剂制备方法,其特征在于:
a. 将牛支原体p48基因合成到pet32a表达载体质粒中,得到阳性重组质粒Pet32-a(+)-p48;
b. 用重组质粒pet32a(+)-p48转化到感受态细胞BL21(DE3),挑取已转化到BL21(DE3)的单菌落接种于含氨苄青霉素的LB液体培养基中培养至OD值至0.6左右,然后吸取一定量的该菌液接种到的含氨苄青霉素的LB液体培养基诱导表达,收集菌体后过柱纯化,得牛支原体P48融合蛋白;
c. 用1份纯化的P48融合蛋白抗原与1份10%醛化-鞣酸化绵羊红细胞(v/v)混合均匀得到检测试剂。
3. 权利要求1所述的牛支原体抗体检测试剂中使用的牛支原体P48重组表达的融合蛋白抗原基因序列为SEQ ID №1。
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