[发明专利]一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法

权利要求书

1.一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，包括去除冷沉淀、血浆过滤和固定床柱层析分离纯化PCC。

2.根据权利要求1所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述具体步骤为

（1）去除冷沉淀：

将新鲜冰冻人血浆在融化混匀后，经连续流离心机去除血浆中的冷沉淀，得到离心后的血浆上清液；

（2）血浆过滤

使用EDTA溶液对过滤材质进行清洗，再用枸橼酸钠溶液对过滤材质进行清洗，并洗去残留的EDTA，冲洗完成后排干设备内的溶液，用于血浆过滤，所采用的过滤材质为药用级别纤维素滤板；

（3）固定床柱层析分离纯化PCC

将凝胶装填在固定床层析柱内，柱床体积与上样的血浆量的比例为1:10~1:50，装填好的层析柱使用缓冲液A平衡2~5个柱体积，经过深层过滤后的血浆使用0.2μm的滤芯进行在线的膜过滤后泵入层析柱，上样流速为60~120cm/h，用缓冲液B洗涤层析柱，用缓冲液C洗脱层析柱，得到PCC制品。

3.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述EDTA溶液的浓度为0.1%-10%，用量为100~300L/m²。

4.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述枸橼酸钠溶液的浓度为0.2%~10%，用量为100~300L/m²。

5.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述步骤（2）血浆过滤中，所述纤维素滤板的层数为单层或双层。

6.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述步骤（3）固定床柱层析分离纯化PCC中，所述缓冲液A由25mmol/L枸橼酸钠和20mmol/L盐酸精氨酸组成，所述缓冲液的PH为7.0。

7.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述步骤（3）固定床柱层析分离纯化PCC中，所述缓冲液B由25mmol/L枸橼酸钠/20mmol/L盐酸精氨酸和0.1~0.4mol/L的NaCl组成。

8.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述步骤（3）固定床柱层析分离纯化PCC中，所述缓冲液C由25mmol/L枸橼酸钠/20mmol/L盐酸精氨酸和0.5~1.0mol/L的NaCl组成。

9.根据权利要求2所述的一种从血浆中吸附人凝血酶原复合物的方法，其特征在于：所述步骤（3）固定床柱层析分离纯化PCC中，所述凝胶为阴离子交换凝胶Capto DEAE。