[发明专利]一种制备卡非佐米的方法

说明书

本发明涉及一种制备卡非佐米的方法。本发明的具体步骤为：A）在活化剂系统的存在下，由树脂固相载体和Fmoc‑Phe‑OH偶联得到Fmoc‑Phe‑树脂；B）通过固相合成法，依次偶联Fmoc‑Leu‑OH、Fmoc‑Homophe‑OH、Fmoc‑Gly‑OH，偶联完毕，脱除Fmoc保护基，在三乙胺条件下往树脂中加入二（2‑氯乙基）醚合成吗啡啉环，肽树脂裂解得到化合物Ⅰ；C）化合物Ⅰ与化合物Ⅱ发生缩合反应，即得卡非佐米。该工艺直接在载体上合成修饰有效的构件，避免了直接购买或者液相合成昂贵的有效构件，有效地提高了收率、降低生产成本。

技术领域

本发明涉及一种多肽类药物的制备方法，具体涉及一种卡非佐米的合成方法。

背景技术

卡非佐米，英名为：Carfilzomib，是含有环氧骨架的四肽，结构式如下：

多发性骨髓瘤是一种浆细胞不正常增生，致使侵犯骨髓的一种恶性肿瘤。恶性骨髓瘤产生时，会引发蚀骨细胞活化，伴随着骨骼外部的硬骨被破坏，引发骨骼疼痛的症状。目前，最常见的治疗多发性骨髓瘤的药物主要有沙立度胺，或来那度胺和地塞米松配合使用以及第一代蛋白酶抑制剂硼替佐米。2012年7月20日，美国食品与药物管理局（FDA）批准了ONYXPHARMSINC 公司产品卡非佐米 (carfilzomib) 注射用冻干粉针剂的上市。卡非佐米是一种四肽基环氧骨架蛋白酶体抑制剂，通过不可逆地结合到N-末端含有苏氨酸的20S蛋白酶体活性位点发挥抗肿瘤细胞增殖和凋亡作用。在动物中，卡非佐米抑制蛋白酶体活性的血液和组织中以及多发性骨髓瘤模型中，血液和实体肿瘤的肿瘤生长延迟。卡非佐米为第二代蛋白酶抑制剂，具有以下优点：首先，它对蛋白酶的抑制作用更加持久且不可逆，因此药效更好，病人产生抗药性的可能性更低；另外，卡非佐米与周围神经突变关系较小且抑制作用更有针对性，因而副作用更小。

卡非佐米现有的合成方法为直线合成法，专利US20050245435 中，卡非佐米合成步骤如下：N-Boc亮氨酸和苯丙氨酸苄酯缩合反应，然后在三氟乙酸作用下脱保护得到其三氟乙酸盐，之后在N,N-二异丙基乙胺、1-羟基苯并三氮唑的催化下与氨基酸缩合生成二肽胺，所得二肽胺脱保护后与氯乙酰氯、碘化钠、吗啉反应，再通入氢气，在钯碳催化下还原得到化合物，所得化合物与侧链缩合即得卡非佐米粗品。这种方法能最终合成卡非佐米，但应用于大规模生产时仍存在一些问题，如直线合成法反应收率较低，所用碘化钠氯取代反应收率不高，因此消耗较多的起始原料；而且此合成方法中由于用到氯乙酰氯，污染较大；此外，此合成方法中反应类型较多，反应条件复杂多样，可控性差，不适用于大规模工业生产。

因此，研发一种收率高、反应简单可控、适用于工业化生产的卡非佐米新的合成方法具有重要的意义。

发明内容

本发明人用现有的合成方法，制备卡非佐米，发现现有技术存在的技术问题是：合成收率低，反应类型较多，反应条件复杂多样，可控性差，不适用于大规模工业生产。为此，本发明人对卡非佐米的合成方法进行了研究，从而得到了本发明的技术方案。

本发明的目的是提供一种制备卡非佐米的方法。本发明的合成路线如图1所示：在活化剂系统的存在下，由树脂固相载体和Fmoc-Phe-OH偶联得到Fmoc-Phe-树脂；通过固相合成法，依次偶联Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Homophe-OH、Fmoc-Gly-OH，脱除Fmoc保护基，在三乙胺条件下往树脂中加入二（2-氯乙基）醚合成吗啡啉环，肽树脂裂解得到化合物Ⅰ；化合物Ⅰ与化合物Ⅱ发生缩合反应，即得卡非佐米。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义；

Fmoc ：芴甲氧羰基

Fmoc-AA ：芴甲氧羰基保护的氨基酸

DIC ：N,N′-二异丙基碳化二亚胺

EDCI.HCl ：1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐