[发明专利]一种用于预防弓形虫病的多价腺病毒疫苗有效
申请号: | 201410345709.5 | 申请日: | 2014-07-18 |
公开(公告)号: | CN104117072B | 公开(公告)日: | 2017-01-11 |
发明(设计)人: | 丛华;袁泉;赵玲潇;丛海滋;张晓丽;尹绘权 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61K39/235;A61P33/02 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 预防 弓形虫 多价腺 病毒 疫苗 | ||
1.一种用于预防弓形虫病的复合多价抗原基因,其特征在于,将泛素蛋白基因与弓形虫速殖子抗原基因SAG3101-144,ROP18347-396,MIC6288-347,GRA7182-224,缓殖子抗原基因MAG158-125,BAG1156-211以及子孢子抗原SPA基因,AS15基因连接起来,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种重组质粒,包括权利要求1所述的复合多价抗原基因和腺病毒载体,其特征在于,将所述的复合多价抗原基因插入到腺病毒载体pHBAd-MCMV-GFP的BamH Ⅰ和SmaI位点间。
3.一种用于预防弓形虫病的腺病毒疫苗,其特征在于,由权利要求2所述的重组质粒与骨架质粒pHBAd-BHG共同转染入细胞中,包装出病毒颗粒。
4.权利要求3所述的用于预防弓形虫病的腺病毒疫苗的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)从弓形虫速殖子抗原SAG3,ROP18,MIC6,GRA7,缓殖子抗原MAG1,BAG1以及子孢子抗原SPA基因中筛选出抗原表位集中的区域,SAG3101-144,ROP18347-396,MIC6288-347,GRA7182-224,MAG158-125,BAG1156-211,SPA142-200以及AS15,构成线型复合多价抗原基因,并在其N端链接泛素蛋白基因,合成用于预防弓形虫病的复合多价抗原基因;
(2)将合成的目的基因经双酶切后插入载体pHBAd-MCMV-GFP的BamH Ⅰ和SmaI位点间,产生pHBAd-MCMV-GFP-UbTg.MEG重组质粒;重组质粒经酶切,PCR和测序鉴定后,提取质粒并纯化,将该重组质粒与骨架质粒pHBAd-BHG共同转染入293细胞中包装出病毒颗粒,即获得重组腺病毒疫苗。
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