[发明专利]用于靶向释放药物载体的脉冲电场敏感脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，特别涉及用于靶向释放药物载体的脉冲电场敏感脂质体的制备方法。

背景技术

脂质体是单层或多层脂质双分子膜以同心圆的形式包封而成，类似细胞膜的微球体，其主要成分为磷脂和胆固醇。20世纪70年代初用脂质体作为药物载体包埋淀粉葡萄糖苷酶治疗糖原沉积病首次获得成功。此后，脂质体作为药物载体具有使药物靶向网状内皮系统、延长药效、降低药物毒性、提高疗效、避免耐受性、改变给药途径等优点，因而受到医药界的广泛关注。但脂质体作为药物载体仍存在对有些疾病的靶向特征不理想等缺点，因而限制了脂质体的临床应用。近年来人们设计开发了温度敏感脂质体、pH敏感脂质体、免疫脂质体、磁性脂质体等新型脂质体以提高脂质体的靶向性。

近二十年来，脉冲电场对细胞膜的电穿孔效应获得了广泛深入的研究，其作用机理是当外加电脉冲电场强度达到kV/cm量级，脉冲宽度为纳米或者微秒量级时，由于磷脂双分子层构成的细胞膜内部充满着电解质和带电荷的离子，在高压电场脉冲作用下，细胞膜内各带电物质在电场作用力下定向移动，并在磷脂双分子层的两侧聚集，膜两侧电位差变大形成跨膜电压，但跨膜电压高于磷脂双分子层临界击穿电压时，脉冲电场则击穿细胞的磷脂双分子层，在细胞膜上形成亲水性的小孔，从而细胞膜的通透性增加，有利于细胞吸收各种药物、基因、蛋白质、其它大分子。同时，利用脉冲电场临床上应用于肿瘤治疗也进行了大量研究，脉冲电场可以引起肿瘤细胞内部出现一系列结构和功能的改变，同时诱导肿瘤细胞凋亡。脉冲电场诱导肿瘤细胞凋亡用于浅表肿瘤(乳腺癌、腋下癌症、靠近胸壁癌症等)病变治疗，可以实现肿瘤的准确定位和微创治疗，且避免了炎症、溃疡等。

镁属于人体营养素矿物质元素中的一种。人体中的镁60-65％存在于骨骼和牙齿中，27％存在于软组织中，细胞内镁离子占1％，多以活性形式Mg²⁺-ATP形式存在。人体的生命活动离不开镁离子。镁离子作为酶的激活剂，参与300种以上的酶促反应。镁离子参与糖酵解、脂肪酸氧化、蛋白质的合成、核酸代谢等，促进骨的形成，在骨骼中仅次于钙、磷，是骨细胞结构和功能所必需的元素，对促进骨形成和骨再生，维持骨骼和牙齿的强度和密度具有重要作用；调节神经肌肉的兴奋性，能抑制钾、钙通道。镁、钙、钾离子协同维持神经肌肉的兴奋性，镁也是重要的神经传导物质，它可以让肌肉放松下来；维护胃肠道和激素的功能，与含钙食品一同补充，能促进钙的吸收。中国营养学会建议，成年男性每天约需镁350mg。成年女性约为300mg。

中国发明专利CN201110340040.7公布了一种多西他赛pH敏感脂质体及其制备方法。该专利根据肿瘤附近的pH值比周围正常组织低的事实,在脂质体的制备过程中加入的物质设计了pH敏感脂质体。中国发明专利CN200480028904.X公布了一种具有糖链的靶向性和肠道吸收控制性脂质体制备方法。中国发明专利CN201210009962.4公布了一种表面修饰有肿瘤归巢肽CREKA或具有CREKA核心序列的肽段的热敏脂质体的制备方法，该专利利用相变温度在人体体温之上的磷脂制备脂质体，当局部超过磷脂的相变温度时，脂质膜由“凝胶态”转到液晶结构，其磷脂的脂酰链紊乱度增加，膜的流动性增大，此时包封的药物的释放速率亦增大，从而达到同过控制病变部位的温度达到定向释放的效果。中国专CN201210052450.6公布了一种氯化钾脂质体注射剂。

近年来新型脂质体的研究已从单一脂质体向多功能脂质体如pH敏感免疫脂质体、热敏性脂质体、热敏感长循环脂质体等方向发展。这些新型脂质体在稳定性、靶向性和疗效方面都比传统脂质体有明显改善。但新型脂质体各自仍存在自身的缺点：

(1)pH敏感免疫脂质体易引起免疫反应；

(2)热敏性脂质体在病变部位的聚集是被动靶向分布，特异性有限，加热时间过长可造成正常结缔组织损伤；

(3)热敏感长循环脂质体由于亲水性大分子的嵌入，在一定程度上降低了脂质体的热敏性，在进行电疗时，药物释放效率低。

随着脂质体研究工作的不断深入，不同理论互相渗透，互相补充，脂质体作为药物载体所转运的药物种类和范围将不断扩大，有着广阔的应用前景。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺点与不足，本发明的目的在于提供一种用于靶向释放药物载体的脉冲电场敏感脂质体的制备方法，制备工艺简单，脂质体对水溶性药物的包封率高、性能稳定，在脉冲电场作用下释放率高。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

用于靶向释放药物载体的脉冲电场敏感脂质体的制备方法，包括以下步骤：