[发明专利]一种检测血清中甘油三酯的方法

权利要求书

1.一种检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)ITO电极的预处理；

(2)把步骤(1)中得到的处理过的ITO电极放入到多巴胺溶液中用缓冲溶液调节pH至碱性条件；

(3)向步骤(2)的体系中加入氯金酸，混匀、反应一段时间得到聚多巴胺-纳米金修饰的ITO电极；

(4)向步骤(3)中得到的聚多巴胺-纳米金修饰的ITO电极表面滴加脂肪酶溶液，低温阴干，得到聚多巴胺-纳米金-脂肪酶生物酶电极；

(5)得到甘油三酯检测标准曲线：将聚多巴胺-纳米金-脂肪酶修饰电极放置于含有梯度浓度甘油三酯的缓冲溶液中在适宜的温度下孵化一定的时间后，用超纯水清洗上述电极后将其放置于含有铁氰化钾的溶液中进行电化学扫描，得到不同浓度甘油三酯对应的循环伏安峰电流；使用还原峰电流作为纵坐标，甘油三酯浓度作为横坐标，绘制甘油三酯的标准曲线；

(6)血清中甘油三酯回收率的测定：首先除去健康人血清中固有的甘油三酯，然后加入不同浓度的甘油三酯，和步骤(5)绘制标准曲线的操作条件相同进行电化学检测，得到的数据在步骤(5)的标准曲线上进行比对，计算甘油三酯的回收率。

2.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所述的步骤(2)中多巴胺溶液的浓度为2mg/mL；缓冲溶液为Tris-HCl缓冲溶液，其pH为8.5。

3.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所述步骤(3)中氯金酸的最终浓度为5μmol/L；反应时间为4h。

4.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所述步骤(4)中向修饰后的电极表面滴加脂肪酶溶液的浓度为2mg/mL；低温阴干温度4℃。

5.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，所述步骤

(5)中反应温度为40℃，反应25min。

6.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所述步骤(5)中，铁氰化钾的最终浓度为5mmol/L。

7.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所使用的缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液，其pH为7.5。

8.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

所述步骤(6)中，除去健康人血清中固有的甘油三酯的方法为：取1mL健康人血清，向其中加入2mg脂肪酶，37℃孵化过夜，然后加入2mL15％三氯乙酸溶液使脂肪酶变性沉淀，12000转/分钟，离心10min，吸取上清液，向其中逐滴滴加0.1mol/L的NaOH溶液，调节pH至7.0，即可得到除去固有甘油三酯的人血清。

9.根据权利要求1所述的检测血清中甘油三酯的方法，其特征在于，

步骤(6)中所述的检测血清中甘油三酯的方法和血清中甘油三酯回收率的测定的电化学扫描为循环伏安扫描。