[发明专利]降钙素原和C反应蛋白的检测试纸及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.降钙素原和C反应蛋白的检测试纸，其特征在于，其为一种量子点标记免疫定量检测试纸，包括底衬以及依次搭接地粘贴于底衬上的样品垫、过滤垫、结合垫、层析膜和吸水垫从而形成多层膜结构，各层膜结构之间部分重叠；所述结合垫上包被有量子点标记的降钙素原特异性抗体I、量子点标记的C反应蛋白特异性抗体I、以及量子点标记的兔IgG；所述层析膜上有一条包被降钙素原特异性抗体II的检测线、一条包被C反应蛋白特异性抗体II的检测线，以及一条包被羊抗兔IgG抗体的质控线；所述降钙素原特异性抗体I、II配对，所述C反应蛋白特异性抗体I、II配对，所述配对的特异性抗体I和特异性抗体II可分别识别对应抗原的不同位点。

2.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述降钙素原的特异性抗体I、II分别为：抗抗钙素单克隆抗体和抗降钙素多克隆抗体；所述CRP的特异性抗体I、II分别为：鼠抗人CRP单克隆抗体7C1/5D1。

3.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，CRP的特异性抗体I、II选自：可与位点N-terminal结合的CRP单抗、可与位点19-108结合的CRP单抗、可与位点FL结合的CRP单抗或可与C-terminal位点结合的CRP单抗。

4.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述量子点标记的降钙素原特异性抗体I、量子点标记的C反应蛋白特异性抗体I以及量子点标记的兔IgG三种量子点的发射荧光波长均大于550nm，且三种量子点波长范围不相同；所述质控线位于所述两检测线的后侧。

5.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述底板为低荧光特性；所述样品垫是一种玻纤膜或聚酯膜，为待检样品收集区，其前端搭接粘贴于底衬前端上；所述过滤垫为红细胞过滤膜，过滤垫位于样品垫与底衬之间，其前端搭接粘贴于底衬上，后端自样品垫后端下方延伸出一定长度；所述结合垫的基体为玻璃纤维素膜或聚酯膜，结合垫位于过滤垫与底衬之间，其前端搭接粘贴于底衬上，后端自过滤垫后端下方延伸出一定长度；所述层析膜为低荧光特性的硝酸纤维素膜，其前端插设于结合垫与底衬之间且搭接粘贴于底衬上，并平铺至底衬的后端；所述吸水垫为吸水玻纤膜，其搭接于底衬后端覆盖于层析膜后端上一定长度。

6.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述量子点选自ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、MgSe、ZnSe、PbSe、PbSe、CdTe、MgTe、ZnTe、HgTe、InAs、InP 中的任意一种或几种化合物的组合；所述量子点中进一步掺杂Cu、Mn 、Hg中至少一种。

7.制备一种如权利要求1-6中任一项所述的降钙素原和C反应蛋白的检测试纸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，量子点标记抗体的制备：用化学交联或生物分子间特异性作用将降钙素原特异性抗体I连接到量子点表面，得到其修饰的量子点；将兔IgG连接到量子点表面，得到其修饰的量子点；将C反应蛋白特异性抗体I连接到量子点表面，得到其修饰的量子点；

步骤2，试纸制作，进一步包括：

制备结合垫：将量子点标记的降钙素原特异性抗体I、量子点标记的C反应蛋白特异性抗体I和量子点标记的兔IgG混合，加入牛血清白蛋白，蔗糖，吐温20，吐温80、曲拉通X-100，之后均匀喷涂在结合垫的基体膜上制成结合垫；

制备层析膜：对层析膜的基材使用PBS封闭液处理，清洗，然后在氮气中干燥；再喷涂降钙素原特异性抗体II形成PCT检测线，C反应蛋白特异性抗体II形成CRP检测线、羊抗兔IgG抗体形成质控线；

层叠：在底板上依次搭接地粘贴样品垫、过滤垫、结合垫、层析膜和吸水垫，从而形成紧密连接且部分重叠的多层膜结构。