[发明专利]抗联苯菊酯单克隆抗体及其用途有效
申请号: | 201410359926.X | 申请日: | 2014-07-25 |
公开(公告)号: | CN104327186B | 公开(公告)日: | 2017-02-01 |
发明(设计)人: | 陆艺文;王鸣华;夏亚中;华修德;周秋君;李伟 | 申请(专利权)人: | 无锡市白蚁防治中心;南京农业大学 |
主分类号: | C07K16/44 | 分类号: | C07K16/44;C12N5/20;G01N33/577 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙)32104 | 代理人: | 曹祖良,刘海 |
地址: | 214071 江苏省无*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗联 苯菊酯 单克隆抗体 及其 用途 | ||
1.一种抗联苯菊酯单克隆抗体,由保藏编号为CCTCC No.C2014135的杂交瘤细胞株产生。
2.一种杂交瘤细胞株,其保藏编号为CCTCC No.C2014135。
3.一种抗联苯菊酯单克隆抗体的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)将式(Ⅰ)所示的免疫半抗原偶联BSA制备得到免疫原;
(2)用免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫剂量为100μL免疫原/只,共免疫五次;首次免疫由等体积的免疫原和弗氏完全佐剂乳化,腹腔注射,之后用等体积免疫抗原和弗氏不完全佐剂乳化;从第三次免疫开始,每次免疫后尾静脉采血,测定效价;
(3)待效价稳定后,将骨髓瘤细胞SP2/0与上述效价最好的小鼠脾脏细胞进行细胞融合,脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0的比例为10:l,制备得到杂交瘤细胞;
(4)通过系列筛选和亚克隆得到能稳定分泌抗联苯菊酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株;再将该杂交瘤细胞株注射小鼠腹内制得腹水;
(5)采用辛酸-硫酸铵法纯化小鼠腹水,得到所述的单克隆抗体。
4.如权利要求1所述的单克隆抗体在制备用于检测联苯菊酯的检测工具中的应用。
5.如权利要求4所述的应用研究,所述检测工具为试剂盒、芯片或试纸。
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