[发明专利]一种环丙烷甲酸酯水解酶、基因、突变体及其应用

权利要求书

1.一种环丙烷甲酸酯水解酶，其特征在于，其是如下的蛋白质(a)或蛋白质(b)：

蛋白质(a)：由序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列组成的蛋白质；

蛋白质(b)：由SEQ ID No.2所示氨基酸序列经过替换、缺失或添加一个或多个氨基酸而得到的具有环丙烷甲酸酯水解活性的衍生蛋白质。

2.根据权利要求1所述的一种环丙烷甲酸酯水解酶，其特征在于，所述的蛋白质(b)为由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第147位丙氨酸残基、第148位缬氨酸残基或第254位甘氨酸残基分别单点替换为其他氨基酸残基或对单点替换进行组合后形成的新氨基酸序列的蛋白质。

3.根据权利要求2所述的一种环丙烷甲酸酯水解酶，其特征在于，所述的蛋白质(b)为SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第147位丙氨酸残基替换为缬氨酸残基，同时第254位甘氨酸残基替换为丙氨酸残基后形成的新氨基酸序列的蛋白质。

4.根据权利要求2所述的一种环丙烷甲酸酯水解酶，其特征在于，所述的蛋白质(b)为SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第147位丙氨酸残基替换为异亮氨酸残基，同时第148位的缬氨酸残基替换为苯丙氨酸残基，同时第254位甘氨酸残基替换为丙氨酸残基后形成的新氨基酸序列的蛋白质。

5.一种分离的核酸，其特征在于，所述的核酸编码如权利要求1-4中任一所述的环丙烷甲酸酯水解酶。

6.根据权利要求5所述的一种分离的核酸，其特征在于，所述的核酸为如序列表中SEQ ID No.1所示核苷酸序列组成的核酸。

7.一种重组表达载体，其特征在于，包含如权利要求5所述的核酸。

8.一种重组表达转化体，其特征在于，包含如权利要求7所述的重组表达载体。

9.一种重组环丙烷甲酸酯水解酶的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：培养如权利要求8所述的重组表达转化体，获得重组表达的环丙烷甲酸酯水解酶。

10.使用如权利要求1所述的环丙烷甲酸酯水解酶或如权利要求9所述方法获得的重组环丙烷甲酸酯水解酶催化2，2-二甲基环丙烷甲酸酯对映选择性水解制备(S)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的方法；

所述的2，2-二甲基环丙烷甲酸酯是2，2-二甲基环丙烷甲酸甲酯，或者是2，2-二甲基环丙烷甲酸乙酯，或者是2，2-二甲基环丙烷甲酸氯乙酯。