[发明专利]一种中药刺激性评价的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，具体设计一种广泛适用于中药刺激性评价的检测方法。

背景技术

中药作为有效防治疾病的手段，其对疾病的治疗理念顺应了二十一世纪医药学发展的新趋势，展示出了强大的生命力和广阔的发展前景。中药在当前中西医院临床中的使用也在明显增加，特别是中药在西医院临床创新药物中的排名已大大提高。中药的销售额近年来不断加大，如文山市的三七，年销售额近50亿。

但是中药在临床使用时经常有不良反应发生，具有安全隐患。不良反应类型多样，最常发生的是药物刺激性。例如，华蟾素注射液具有抗肿瘤的作用，但是对血管有刺激性；六神丸成分较多，对机体产生一定的刺激性。溶血反应也是药物刺激性反应的一种表现形式，例如鱼腥草注射液中吐温-80超标容易引起溶血。此外，还涉及心血管系统、消化系统、神经系统、泌尿系统、感觉器官、皮肤及其附件等多个系统的不良反应。一定程度上限制了中药的用药安全和新药开发。

对于中药刺激性，有效的检验和检测方法至关重要。近年来关于刺激性评价的动物模型研究较多，一般为局部刺激实验，如兔眼刺激试验等。但是这些模型缺乏明显直观且可定量化的疼痛与炎症指标，需要发展新的药物刺激性评价方法。本发明利用药物刺激大鼠足趾模型，以提足次数(疼痛)和肿胀度(炎症)两个指标来评价药物的刺激性，建立一种直观、简单和实用的中药刺激性评价方法。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是克服现有技术不能有效检测中药刺激性的不足，提供一种具有普适性，且直观、方便、快捷的中药刺激性评价方法。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种中药刺激性评价的检测方法，将药物原液或将药物原液浓缩富集后，皮下注入实验动物足趾，计算提足次数，测量足趾肿胀度和记录注射药液前后的足趾体积来评价中药刺激性。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，药物原液浓缩富集的方法包括超滤浓缩、干燥浓缩、离心浓缩。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，药物原液浓缩富集的倍数为1-100倍。更加优选将药物原液浓缩富集10倍。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，药物原液的浓度为0.1-1000mg/ml。特别优选的药物原液的浓度为20mg/ml。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，实验动物优选大鼠，注入体积为0.01-2ml，更加优选的注入体积为0.1ml。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，皮下注入药物后，记录提足反应的产生时间，并计数产生提足后5min-8h的提足次数，更加优并首次提足后10min-30min内的提足次数。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，所述的药物原液为中药、中成药或中药注射液的原液。当然本发明也可以用于西药的刺激性评价。

作为优选方案，以上所述的中药刺激性评价的检测方法，所述的足趾肿胀胀度可用足趾肿胀仪来检测。

中药制剂在生产和存放过程中可能产生微量的刺激性物质，研究需要高浓度的刺激性物质。超滤、冷冻、离心等方法可以达到浓缩药物的作用，而超滤是一种有效排除小分子干扰的技术，而且3KD的超滤管可截留并富集到高浓度刺激物；冷冻干燥是一种把低浓度水提液干燥至粉末的技术，可由粉末配制成高浓度刺激物；离心浓缩是一种挥去提取液，直接浓缩药液的技术。这些浓缩方法具有损耗小、效率高、操作便捷的优点，使药物刺激性更加明显，可增加刺激性检测方法的灵敏性。

有益效果：本发明提供的中药刺激性评价的检测方法和现有技术相比具有以下优点：

传统的药物刺激性评价模型为家兔眼球刺激法，该方法主观定性观测药物的刺激性，无法客观的定量评价药物因此的疼痛和炎症反应。为了实现上述目的，本发明创新性采用了药物刺激大鼠足趾模型，皮下注射药物后，大鼠出现提足反应，并且足趾出现明显的红肿现象。以计数提足次数反应药物刺激的疼痛，以药物注射前后足部体积的变化反应药物诱导的炎症，并总体评估药物的刺激性，建立一种直观、准确和广泛的中药刺激性评价方法。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施例1 蟾酥生药的刺激性检测

一、方法

1、蟾酥生药的提取和配制