[发明专利]蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽融合体及其获得方法

说明书

本申请是沈阳药科大学2010年2月9日申请的申请号为201010107466.3，发明名称为“蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽融合体及其获得方法”的分案申请。 

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，涉及蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽融合体及其获得方法，具体地说，本发明涉及系列蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽融合体或该系列融合体的部分片段或该系列融合体衍生物、类似物的结构及其制备方法，以及作为镇痛药物和抗肿瘤药物在医药领域中的应用。 

背景技术

蝎作为传统中药已有2000多年的药用历史，是我国的传统名贵中药，具有较大的开发价值。近年来人们已经发现了多种具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、抗癫痫等药理作用的蝎毒单组分多肽。天然蝎毒产量极低，因此，采用基因工程方法，用简单的原核或真核生物表达宿主生产具有药用价值的活性蝎毒多肽的方法显得尤为重要。 

提高抗肿瘤药物之肿瘤细胞特异选择性的一种方法是优先向肿瘤细胞表面递送药物。可借助几种方法将药物导向肿瘤细胞。其中方法之一是依赖存在于肿瘤细胞表面上的特异性受体分子。被称为“导向剂”的分子可以识别这些细胞表面受体并与之特异性结合。所说的“导向剂”可包括抗体、生长因子或激素等。识别特异性细胞表面受体的“导向剂”可将药物导向具有这些表面受体的细胞。 

功能蛋白融合体是近年来发展起来的具有广泛应用前景的生物治疗新方法，主要是通过导向部分将药物特异且高效地聚集于病灶部位，从而实现靶向杀伤病变细胞的目的。一般情况多在导向部分和蛋白药物之间添加一部分柔性连接物序列，可以有效地保持两端蛋白的各自构型，改善分子的空间柔曲性，以有利融合体蛋白导向部分与相应受体的结合以及蛋白药物发挥固有的治疗作用。 

基于此，有人曾利用小鼠白介素3(mIL-3)作为导向部分与白喉毒素结合，并在两个部分之间插入一个短肽接头序列Gly₄Ser，得到融合蛋白质DAB389-Gly₄Ser-mIL-3，体外和体内实验结果显示，与不带接头序列的融合蛋白DAB389-mIL-3相比，前者对肿瘤细胞的特异性细胞毒作用提高约5-10倍(参见Domunique.et al,FEBS Letters 406:157-161,1997)。Amotz Nechushtan等首次报道并应用GnRH 10肽作为导向肽构建嵌合毒素(GnRH-PE66)，经过体内外相关实验研究并探讨了其针对腺癌细胞的靶向杀伤活性，从而为促黄体生成素释放激素的更广泛应用开阔了思路(Amotz Nechushtan,Shai Yarkoni,Irina Marianovsky etal.Adenocarcinoma Cells Are Targeted by the New GnRH-PE66Chimeric Toxin through Specific Gonadotropin-releasing Hormone Binding Sites.THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY,272:11597-11063,1997)。最近也报导了一种基于接头序列的，有假单胞菌外毒素(PE)和促性腺激素释放 素(GnRH)组成的嵌合蛋白(GnRH-L-PE66或GnRH-L-PE40)。体外和体内实验结果表明，GnRH-L-PE对多种肿瘤细胞系具有细胞毒活性和肿瘤生长抑制活性，并且活性显著高于不带有接头序列的GnRH-PE。因此，带有柔性连接物的嵌合毒素将会成为一种潜在的肿瘤治疗药物。 

专利名称为蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽及获得方法(发明专利号：ZL01128235.5)的发明提供了一种具有较好镇痛效果和抗肿瘤的蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽及获得方法，而要得到具有镇痛和抗肿瘤生物活性，同时又对肿瘤细胞实现靶向杀伤功能的系列融合体或该系列融合体的部分片段或该系列融合体衍生物、类似物及其获得方法却有待于进一步研究。