[发明专利]一种检测麻痹性贝类毒素的方法无效
| 申请号： | 201410369789.8 | 申请日： | 2014-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN104198536A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 王平;邹玲;黎洪波;周洁;胡宁;苏凯麒;杜立萍;王琴 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N27/02 | 分类号： | G01N27/02 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 邱启旺 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 麻痹 贝类 毒素 方法 | ||
1.一种检测麻痹性贝类毒素的方法，该方法在小鼠神经瘤细胞阻抗传感器上实现，所述小鼠神经瘤细胞阻抗传感器由细胞培养孔（1）、细胞阻抗芯片安装台（2）、芯片电路板（3）、芯片连接弯针（4）；细胞培养孔（1）位于细胞阻抗芯片安装台（2）上，芯片电路板（3）与细胞阻抗芯片安装台（2）连接，芯片连接弯针（4）与芯片电路板（3）连接，芯片连接弯针（4）将芯片电路板（3）上的阻抗信号传输给电脑；细胞培养孔（1）中安装有阻抗电极（5）；其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）将细胞融合度达到80-90%的neuro2a细胞接种到2个细胞培养孔（1）中，每个细胞培养孔（1）中培养液总体积为300 μl，细胞个数为30000个；细胞培养24小时后，每孔用270 μl新鲜的培养液更换原培养液；
（2）选取1个细胞培养孔（1）作为实验组，向细胞培养孔（1）加入10 μl待测溶液、10 μl的15 mM的乌本苷和10 μl的1.5 mM的藜芦定溶液；
另一个细胞培养孔（1）作为对照组，向每个细胞培养孔（1）加入10 μl培养液、10 μl的15 mM的乌本苷和10 μl的1.5 mM的藜芦定溶液；
（3）将传感器芯片放回培养箱继续培养；
（4）检测各个细胞培养孔（1）的CI值，当实验组的CI值大于对照组细胞培养孔的CI值时，则判定为该待测溶液含有麻痹性贝类毒素；CI值越高，麻痹性贝类毒素含量越高；
所述培养液为RPMI1640培养基，其中添加了体积分数为10%的胎牛血清，质量分数为1%的丙酮酸钠，质量分数为1%的非必需氨基酸、质量分数为1%谷氨酰胺、质量分数为1%的P/S双抗。
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