[发明专利]一种板蓝根药材的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药材质量检测领域，具体涉及一种板蓝根药材的质量检测方法。 

背景技术

板蓝根，常用别名靛青根、蓝靛根或大青根，是一种中药药材。中国各地均产。板蓝根分为北板蓝根和南板蓝根，北板蓝根来源为十字花科植物菘蓝和草大青的根；南板蓝根为爵床科植物马蓝的根茎及根。具有清热解毒、凉血消肿、利咽之功效。板蓝根是一种用量极大且长期销售不衰的药材，纵观板蓝根的历史，我们可以看到其销量在飞速增长。板蓝根含多种化学成分，主要含有尿苷、鸟苷、腺苷、总酸等。现代研究表明板蓝根含有的成分具有广泛的生理活性作用，其含量与板蓝根的清热解毒等功效密切相关，因此其含量的多少常作为板蓝根药材质量控制的重要指标。 

近几年板蓝根的市场需求量持续增加，野生资源逐年减少，人工栽培发展缓慢，使得板蓝根资源蕴藏量和产量都在大幅下降。导致市场上出现了很多伪品，其中不少伪品的农药残留量超标爆表，给板蓝根药材的质量、用药的安全性及有效性带来了很大的冲击，已成为制约板蓝根系列药材开发的瓶颈。 

目前，正品板蓝根的有效检测方法是传统的形态特征和理化特性的鉴别方法，具有一定的局限性，不足以从整体上控制板蓝根的质量，作为一味临床常用中药，其真伪优劣受其理化指标、农药残留量多等诸多因素的影响，因此有必要建立一种科学的质量检测方法对板蓝根的质量进行评价。 

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中板蓝根药材检测方法复杂，质量难以调控的问题，进而提供一种准确度高，简单、快速的检测板蓝根药材的方法。 

为解决上述技术问题，本发明是通过如下技术方案实现的： 

本发明提供了一种板蓝根药材的检测方法，该方法包括如下有效成分含量的测定步骤以及农药残留量的测定步骤，其中： 

A：尿苷、鸟苷、腺苷含量的测定包括如下步骤： 

(1)分别精密称取鸟苷对照品3.56mg、尿苷对照品4.60mg和腺苷对照品4.49mg，加甲醇制成每1mL分别含22.78μg、29.40μg和含28.74μg的混合对照品溶液； 

(2)精密称取板蓝根药材粉末0.5g，精密加入水25mL，超声40分钟；取上清液，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液的制备； 

(3)照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以乙腈为流动相A、以水为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：2-20min，A：B为2％：98％→40％：60％；控制柱温为30℃，流量为0.6mL/分钟进行检测，检测波长分别为：0min，254nm；7min，262nm；8min，246nm；10min，259nm；12min，254nm； 

分别取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定； 

B：所述总酸含量的测定包括如下步骤： 

(1)精密称取待测板蓝根药材5g，加70％乙醇置水浴上加热回流提取3次，每次50ml且每次回流1.5小时，滤过，60℃时，滤液浓缩至相对密度1.05，浓盐酸调pH至2～3，用乙酸乙酯萃取，减压回收乙酸乙酯至干，加70％乙醇溶解定容至25ml，得到供试品溶液； 

(2)总有机酸以水杨酸计，采用直接滴定法测定其总有机酸的含量； 

C：所述农药残留量的测定包括如下步骤： 

(1)精密称取三苯基磷酸酯适量，加丙酮制成每1ml含100μg三苯基磷酸酯的溶液，作为内标贮备液； 

分别精密量取各农药对照品贮备溶液1ml及所述内标贮备液1ml，加丙酮定容至100ml，作为混合对照品贮备溶液；分别精密量取适量，加乙腈定容制成20-1000ng/ml的不同浓度的溶液，作为混合对照品溶液； 

另取核糖酸内酯适量，加乙腈溶解制成每1ml含20mg核糖酸内酯的溶液，另取山梨醇适量，加水溶解制成每1ml含山梨醇10mg的溶液；分别精密量取上述核糖酸内酯、山梨醇溶液各1ml混匀，加乙腈定容至10ml，作为分析保护剂； 

(2)精密称取待测药材细粉10g，并加入氯化钠1g混匀，精密加入丙酮100ml，冰浴超声处理30分钟，离心，将上清液迅速移入装有1g无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置30分钟；随后精密量取上述溶液60ml减压浓缩至近干，并加入体积比为1：1的环已烷-乙酸乙酯溶液溶解样品并定容至10ml，过滤后取滤液经GPC凝胶渗透色谱净化，以体积比为1：1的环已烷-乙酸乙酯溶液为流动相洗脱，收集洗脱液，移入KD瓶中，减压浓缩至近干；