[发明专利]一种络合提取角鲨烯的工艺

说明书

技术领域

本发明属于生物活性物质的分离纯化领域，具体涉及一种利用银离子络合技术络合萃取植物角鲨烯的方法。

背景技术

角鲨烯是一种高度不饱和烃类化合物，一种脂质不皂化物，其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，是一种开链三萜类化合物，具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能，广泛应用于医药、食品、化妆品、化工等领域。

角鲨烯广泛存在于动植物体内，尤其在深海鲨鱼肝脏中含量最为丰富。近年来，出于对野生海洋动物的保护，同时由于从深海鲨鱼肝脏中提取角鲨烯的工艺繁琐、提取成本高，因此从植物油脂中提取角鲨烯逐渐成为热点。

山茶起源于中国，对于中国南方的经济发展有着重要的作用。山茶种仁含有丰富的营养物质，压榨的山茶油富含较高的不饱和脂肪酸、山茶甙、茶多酚、角鲨烯等生理活性成分，以及维生素E和钙、铁、锌等微量元素，营养成分与橄榄油相似。其中不饱和脂肪酸含量高达92％(油酸78％，亚油酸14％)，与其它食用油相比，山茶籽油的油酸含量是所有植物油中最高的。因此，山茶油享有“油中之王”和“东方橄榄油”的美誉。但是，目前从植物油中提取分离角鲨烯的研究较多，许多成果已经产业化，但是关于从山茶油中提取分离角鲨烯的方法，在国内外一直是鲜有报道。

银离子络合萃取法是基于银离子Ag²⁺与不饱和有机物碳碳双键络合反应的分离方法。该方法选择性强，目前主要用于高纯度DHA乙酯、α-亚麻酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸等的分离与纯化，但尚未见将银离子络合萃取方法用于角鲨烯分离的研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种络合提取角鲨烯的工艺，该工艺将银离子络合萃取技术，用以分离山茶油中的角鲨烯，不仅适用于不饱和脂肪酸的分离，还适用于含碳烯比小于或等于6生物活性物质。

为解决上述技术问题，本发明采用了的技术方案如下：

一种络合提取角鲨烯的工艺，该方法包括如下步骤：

(1)将油茶树的种仁破碎，加石油醚进行超声提取，过滤，滤液减压浓缩，即得山茶油脂溶性物质浓缩液；

(2)将步骤(1)得到的山茶油脂溶性物质浓缩液与强碱的醇溶液混合，水浴加热、搅拌回流，通过皂化和甲酯化反应除去脂肪酸，再用石油醚提取角鲨烯，即角鲨烯粗品；

(3)将步骤(2)得到的角鲨烯粗品，加入硝酸银甲醇水溶液后，在低温下，振荡或搅拌的条件下进行络合反应，低温下静置、分液，获得中间产物银离子-角鲨烯络合物的水溶液；

(4)将步骤(3)得到的银离子-角鲨烯络合物的水溶液，加入石油醚，加热回流进行反萃，再静置、分液，获得解离后的角鲨烯石油醚有机相；

(5)将步骤(4)得到的角鲨烯石油醚有机相用NaCl水溶液清洗，再减压蒸馏，回收有机溶剂；再次蒸馏水清洗洗后，在低温下真空干燥，即得到终产物角鲨烯精品。

步骤(1)、(2)、(4)中，所述的石油醚用正己烷替换。

步骤(1)中，所述的超声提取，超声功率为60～200W，优选80～200W，最优选160W，提取时间为20～50min，优选20～40min，最优选30min。

步骤(1)中，滤液减压浓缩至角鲨烯含量为8～10g/L。

步骤(2)中，所述的强碱的醇溶液，其中，溶质强碱为氢氧化钠或氢氧化钾，溶剂醇为甲醇或乙醇，溶质强碱的浓度为0.4～0.9mol/L，优选0.5～0.8mol/L，最优0.7mol/L；山茶油脂溶性物质浓缩液与强碱的醇溶液体积比为1：10～50，优选1:10～30，最优1:20。

步骤(2)中，水浴加热温度为30～70℃，优选50～60℃，最优50℃，搅拌回流反应时间为1～4h，优选1.5～2.5h，最优2h。

步骤(3)中，所述的硝酸银甲醇水溶液中，溶质硝酸银的浓度为0.12～0.84mol/L，优选0.48～0.84mol/L，最优选0.6mol/L；甲醇水溶液中，甲醇的体积百分浓度为40～80％，优选60％～70％，最优选65％；角鲨烯粗品中的角鲨烯与硝酸银的摩尔比为1:6～42，优选1:30；所述的低温为0～15℃，优选0～10℃，最优选0℃；络合反应时间为12～24h，优选12h。