[发明专利]一株抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用有效
| 申请号： | 201410377894.6 | 申请日： | 2014-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN104130980A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 匡华;孔娜;胥传来;徐丽广;马伟;刘丽强;宋珊珊;吴晓玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C12P21/08;C12R1/91 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株抗甲羟 孕酮 特异性 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一株抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株，命名为单克隆细胞株E号，又称杂交瘤细胞株4F9，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9305，保藏日期为2014年5月28日。
2.权利要求1所述抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的应用，其特征在于：免疫得到的抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体，甲羟孕酮的50% 抑制浓度IC50为0.067ng/mL，与其他类似物交叉反应率均小于0.1%。
3.根据权利要求2所述抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的应用，其特征在于免疫得到的抗甲羟孕酮特异性单克隆抗体，免疫所用之甲羟孕酮半抗原的制备步骤如下：甲羟孕酮0.1mmol溶解于3mL无水二甲亚砜为A液，二溴乙酸0.2mmol溶解于1.4mL无水二甲亚砜为B液，A液中加入氢氧化钾粉末1.5mmol，室温条件下搅拌至溶液颜色变为微黄色，将B液逐滴加入到A液中，黄色逐渐加深，室温反应4h，用50mL冰水终止反应，乙酸乙酯萃取三遍，合并水相，将水相用2mol/L盐酸酸化得黄色沉淀，水洗四遍至中性，干燥后得到黄色甲羟孕酮半抗原MP-2CME粉末。
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