[发明专利]红曲菌种、高活性成分功能性红曲粉的制法及制品有效
申请号: | 201410379473.7 | 申请日: | 2014-08-04 |
公开(公告)号: | CN104293680B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 胡文林;谢凤娇;陈影妮 | 申请(专利权)人: | 东莞市天益生物工程有限公司;广东天益生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 广州高炬知识产权代理有限公司 44376 | 代理人: | 董博 |
地址: | 523000 广东省东莞市松山湖科技*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红曲 菌种 活性 成分 功能 制法 制品 | ||
1.一种红曲菌种,命名为红曲菌TY728(Monascus rubei TY728),其于2014年7月31日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),生物保藏编号为:CCTCC NO:M 2014363。
2.一种采用权利要求1所述的菌种制取高活性成分功能性红曲粉的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制取菌种:
制取红曲菌种作为发酵菌种;
(2)菌种经培养基培养:
将步骤(1)所制取的菌种分别用下列培养基培养:斜面培养基、种子液培养基、液态摇瓶培养基;
(21)所述的斜面培养基为:可溶性淀粉3-5%,麦芽糖3-5%,蛋白胨2-4%,琼脂2-4%,硝酸钠0.5-0.8%与剩余量的水混合而成;将该斜面培养基装入三角瓶中,经灭菌、冷却,接种步骤(1)菌种并进行斜面培养基的培养,在30℃培养箱中培养至菌丝长满斜面;
(22)所述的种子液培养基为:葡萄糖20-24g/L,蛋白胨30-34g/L,甘油20-22g/L,硝酸钠2-4g/L,硫酸锌2-4g/L,磷酸二氢钾1-2g/L,经灭菌、冷却;用40-60mL无菌水洗涤步骤(21)三角瓶斜面孢子后所得的斜面培养液,按照体积比为该种子液培养基的50-60%接种到装有100ml该种子液培养基的三角瓶中,在30℃、180r/min的旋转式摇床上液态培养1天;
(23)所述的液态摇瓶培养基为:淀粉16-18%、硝酸钠0.4-0.6%、酵母膏0.6-0.8%、玉米浆0.8-1%与剩余量的水混合、用乳酸调节PH值为4.0而制成的,经灭菌、冷却;将步骤(22)所得的种子液培养种,按照体积比为该液态摇瓶培养基的50-60%的量接种到装有100mL该液态摇瓶培养基的三角瓶中,在28℃、180r/min的条件下液态摇瓶培养2天;
(3)发酵处理:
以大米粉-甘油作为碳源,黄豆作为主要氮源,蛋白胨、玉米浆为辅料作为氮源、用乳酸调节pH值而制成发酵培养基,将该发酵培养基装入三角瓶中,经高温灭菌后冷却至常温,将步骤(23)所生产的液态摇瓶种,按体积百分比为6-8%的接种量接种于50ml该发酵培养基中,于26℃发酵12天;
(4)深层液态发酵:
以步骤(3)所得的液态摇瓶种发酵液为基础,采用发酵罐、经分批间歇发酵、深层发酵调节的优化,设定发酵培养工艺,进行深层液态发酵,得到功能红曲发酵液;
(5)发酵后处理:
将步骤(4)所得的功能红曲发酵液,采用罐组式连续逆流提取工艺进行提取,之后采用厢式隔膜压滤机进行纯化、浓缩、精制,并进行喷雾干燥,得到低桔霉素高色价高活性成分的功能性红曲粉。
3.根据权利要求2所述的制取低桔霉素高色价高活性成分的功能性红曲粉的方法,特征在于,所述的步骤(3)中发酵培养基为大米粉10-12g/L、甘油8-10g/L、黄豆6-8g/L、蛋白胨1-3g/L、玉米浆2-4g/L、硫酸镁4.5-6.0g/L、磷酸二氢钾1-2g/L、硝酸钠0.4-0.6g/L、酵母膏0.6-0.8g/L,乳酸调节pH值为3.5。
4.根据权利要求2所述的制取低桔霉素高色价高活性成分的功能性红曲粉的方法,特征在于,所述的步骤(4)中的发酵培养工艺为发酵罐采用30m3发酵罐,初定发酵有效体积为22.0立方米,发酵时生长温度32-35℃,通风比为1:0.3-0.6,罐压0.4-0.7MPa,时间65-85h。
5.根据权利要求2所述的制取低桔霉素高色价高活性成分的功能性红曲粉的方法,特征在于,所述的步骤(5)中的罐组式连续逆流提取工艺为三级逆流提取,其中提取温度为25-55℃、提取溶剂乙醇用量为5-15L/kg、提取时间为40-60min。
6.根据权利要求2所述的制取低桔霉素高色价高活性成分的功能性红曲粉的方法,特征在于,所述的步骤(5)中的厢式隔膜压滤机中超滤MWCO10000、纳滤MWCO200。
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