[发明专利]鉴定或辅助鉴定小麦抗寒性的方法

权利要求书

1.用于鉴定待测小麦抗寒还是不抗寒的引物组合物，由单独使用的引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对7、引物对8和引物对9组成；

所述引物对1由序列表中序列1所示的单链DNA分子361S-F和序列表中序列2所示的单链DNA分子VA1-R组成；

所述引物对2由序列表中序列3所示的单链DNA分子361W-F和序列表中序列2所示的单链DNA分子VA1-R组成；

所述引物对3由序列表中序列4所示的单链DNA分子VRN1AF和序列表中序列5所示的单链DNA分子VRN1-INT1R组成；

所述引物对4由序列表中序列6所示的单链DNA分子Intr1/A/F2和序列表中序列7所示的单链DNA分子Intr1/A/R3组成；

所述引物对5由序列表中序列8所示的单链DNA分子Intr1/C/F和序列表中序列9所示的单链DNA分子Intr1/AB/R组成；

所述引物对6由序列表中序列10所示的单链DNA分子Intr1/B/F和序列表中序列11所示的单链DNA分子Intr1/B/R3组成；

所述引物对7由序列表中序列10所示的单链DNA分子Intr1/B/F和序列表中序列12所示的单链DNA分子Intr1/B/R4组成；

所述引物对8由序列表中序列13所示的单链DNA分子Intr1/D/F和序列表中序列14所示的单链DNA分子Intr1/D/R3组成；

所述引物对9由序列表中序列13所示的单链DNA分子Intr1/D/F和序列表中序列15所示的单链DNA分子Intr1/D/R4组成。

2.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于：所述引物组合物中各引物均为等摩尔比。

3.权利要求1或2所述的引物组合物在鉴定或辅助鉴定待测小麦抗寒还是不抗寒中的应用；

或权利要求1或2所述的引物组合物在制备鉴定或辅助鉴定待测小麦抗寒还是不抗寒产品中的应用；所述产品具体为试剂盒。

4.一种鉴定或辅助鉴定待测小麦抗寒还是不抗寒的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组DNA为模板，分别用权利要求1或2所述的引物组合物中的9对引物对进行PCR扩增，检测扩增产物：

若扩增产物满足如下1)-3)的全部标准，则待测小麦抗寒或候选抗寒：1)引物对2扩增得到的扩增产物大小为469bp或引物对5扩增得到的扩增产物大小为1068bp，且引物对1、引物对3、引物对4没有扩增产物；2)引物对7扩增得到的扩增产物大小为1149bp，且引物对6没有扩增产物；3)引物对9扩增得到的扩增产物大小为997bp，且引物对8没有扩增产物；

若扩增产物满足不符合上述情况，则待测小麦不抗寒或候选不抗寒。

5.一种鉴定或辅助鉴定待测小麦抗寒还是不抗寒的方法，包括如下步骤：检测待测小麦的5A、5B和5D染色体上的Vrn1基因是否为隐性，若5A、5B和5D染色体上的Vrn1基因均为隐性，则待测小麦抗寒或候选抗寒，若不符合上述情况，则待测小麦不抗寒或者候选不抗寒。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述检测待测小麦的5A、5B和5D染色体上的Vrn1基因是否为隐性的方法包括如下步骤：

以待测小麦的基因组DNA为模板，分别用权利要求1或2所述的引物组合物中的9对引物对进行PCR扩增，检测扩增产物：

若扩增产物满足如下1)-3)的全部标准，则待测小麦的5A、5B和5D染色体上的Vrn1基因均为隐性：1)引物对2扩增得到的扩增产物大小为469bp或引物对5扩增得到的扩增产物大小为1068bp，且引物对1、引物对3、引物对4没有扩增产物；2)引物对7扩增得到的扩增产物大小为1149bp，且引物对6没有扩增产物；3)引物对9扩增得到的扩增产物大小为997bp，且引物对8没有扩增产物；

若扩增产物不符合上述情况，则待测小麦的5A、5B和5D染色体上的Vrn1基因不全为隐性。

7.根据权利要求4-6中任一所述的方法，其特征在于：

所述待测小麦为在每年秋季播种后经历越冬期的小麦。