[发明专利]一种合成以谷氨酸为首个氨基酸残基二肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种合成苄氧羰基谷氨酸5甲酯1琥珀酰亚胺酯进而合成以谷氨酸为首个氨基酸残基的二肽的工艺，属于化学合成技术领域。

背景技术

谷氨酸二肽不仅是重要的化工原料,在药物载体，多肽，医药生物材料合成方面也得到广泛应用。例如：谷氨酰色氨酸可以直接用于药物中，是一种广谱免役调节类化合物(例如：SCV-07)；其另一构型的钠盐用于多肽药物定位释放制剂领域(专利ZL 2011 10347965.4)；谷氨酰谷氨酸二肽也可用于抗凝血药物比伐卢定的合成(Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-I le-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu)；谷氨酰苏氨酸也可用于长肽的合成(例如：ABZ-GLU-THR-LEU-PHE-GLN-GLY-PRO-VAL-P-NITRO-PHE-NH2)。主要报道合成路线有，以Z-Glu(Obzl)为起始原料，进行活化端羧基进行接肽，但是这个起始原料得到的活酯，得不了固体，接肽后的产物也得不了结晶。再进一步合成目标产物(Shiba,T.；Kaneko,T.Bulletin of the Chemical Society of Japan,1960,vol.33,p.1721–1730)，得到的目标产物很难提取，在医药中的应用受到一定的限制。另一种合成工艺也是以Z-Glu(Obzl)为原料进行活化，反应底物为谷氨酸双苄酯盐酸盐或者是其对甲苯磺酸盐进行反应，但是其合成步骤太长，总收率低，不适合工业化生产。还有一种工艺是固相肽的合成，固相合成肽主要针对长肽进行，生产量也较小，工业化的成本太高。

上述合成工艺均制约了这个产物在实际中的应用，因此得寻求一种更简便可行,操作良好,环保的,更低成本的工业化生产工艺。

发明内容

本发明的目的，是提供一种谷氨酸5甲酯为起始原料，合成能够用于接肽的高纯活性中间体，适合工业化的工艺。制得高纯度，低成本的产物。其技术方案是：

一种合成以谷氨酸为首个氨基酸残基二肽的方法，以谷氨酸5甲酯为起始原料，采用苄氧羰基保护谷氨酸5甲酯的氨基，与二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺反应，制得中间体苄氧羰基谷氨酸5甲酯1琥珀酰亚胺酯，再在碱性条件下与另一组份氨基酸反应得到保护的二肽，最终氢化得到以谷氨酸为首个氨基酸残基的二肽，包括如下步骤：

(1)、将谷氨酸5甲酯加入到水中，用碱调节至溶解，加入保护试剂，待谷氨酸5甲酯反应至95％以后，加入酸酸化，然后萃取、浓缩得到苄氧羰基谷氨酸5甲酯Z-Glu(Ome)固体；

(2)、将苄氧羰基谷氨酸5甲酯Z-Glu(Ome)溶于有机溶剂中，加入二环己基碳二亚胺DCC和N-羟基琥珀酰亚胺HOSU，待苄氧羰基谷氨酸5甲酯Z-Glu(Ome)反应至95％以后，停止反应，然后过滤、浓缩得到苄氧羰基谷氨酸5甲酯1琥珀酰亚胺酯Z-Glu(Ome)-OSU固体；

(3)、将另一氨基酸组份溶于水中，氨基酸组份为游离的氨基酸或者是氨基酸酯，加碱调节至溶解，加入苄氧羰基谷氨酸5甲酯1琥珀酰亚胺酯Z-Glu(Ome)-OSU,维持PH值8-10，待苄氧羰基谷氨酸5甲酯1琥珀酰亚胺酯Z-Glu(Ome)-OSU反应至98％以上，加酸调节至PH值为2-3析出固体，得到保护的二肽Z-Glu-X(即得到谷氨酸氨基保护的二肽)；

(4)、将保护的二肽Z-Glu-X加入到水中，加入钯炭，通入氢气，至Z-Glu-X反应完毕(苄氧羰基保护的二肽反应完毕)，过滤，得到Glu-X(谷氨酸二肽)的水溶液，浓缩水后得到Glu-X结晶，即目标产品以谷氨酸为首个氨基酸残基的二肽。

步骤(1)中所述保护试剂是Z-Cl、Z-OSU之一，所述碱是碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠之一，所述酸是盐酸。

步骤(2)中所述有机溶剂是乙酯叔丁酯、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷之一。

步骤(3)中所述另一组氨基酸组份是游离氨基酸或者氨基酸酯，所述碱是氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾之一，所述酸是盐酸，硫酸，稀硝酸之一。

本发明的有益效果：该工艺打破了中间体不能结晶传统，获得高纯度的产物(HPLC99.0％以上)，原料易得，价格低廉，简化了合成步骤，缩短了工艺流程，生产环境友好，操作简单，成本低，绿色环保，基本无三废排出，利于工业化规模生产。

具体实施方式：

下面详细说明本发明的实施步骤。

一、合成Glu-Glu，反应如下式：