[发明专利]一种中山杉品种118的组织培养繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中山杉品种118(Taxodium hybrids‘zhongshansha118’)的组织培养的繁殖方法，属于木本植物种苗繁殖的技术领域。

背景技术

中山杉(Taxodium hybrids‘zhongshansha’)为杉科(Taxodiaceae)落羽杉属(Taxodium)。中山杉为半常绿高大乔木，树体高大雄伟，树型优美，是落羽杉(T.distichum)、池杉(T.ascendens)、墨西哥落羽杉(T.mucronatum)三个树种的优良种间杂交种，由江苏省中国科学院植物研究所多年选育而成。中山杉具有生长速度快，耐水湿，耐盐碱，病虫害少，抗风性强等优点，因此是优良的滩涂盐碱地的绿化树种。

由于中山杉的树干纹理直，结构细致，材质轻柔，耐腐防蛀，因此广泛用于建筑，桥梁，造船，家具等方面，所以杉树在中国的建材市场占据广阔的市场。

通过对中山杉302(♀)与墨西哥落羽杉()回交一代苗期生长的筛选，选出了具有潜在推广价值的新无性系：BCF₁118。同时通过外部形态，同工酶和RAPD这3种方法对杂交后代进行杂交鉴定，确定他们是中山杉302与墨西哥落羽杉的杂交种。BCF₁118无性系的株高和地径的生长量大于母本中山302，同时具有耐盐碱特性，是优良的无性系，作为速生用材树种潜力更大。2004年“中山杉118”通过江苏省林业局林木新品种审定委员会认定，目前已分别在江苏和浙江建立中山杉良种苗木生产基地，得到了林业园林和公路等绿化部门的广泛关注。

目前，绝大多数杉科树种以种子繁殖和扦插育苗为主，但往往面临种子缺乏，发芽率偏低等困难，而且实生苗变异大，母株优良性状得不到保持；扦插生根情况不稳定，早期造林成活率低。

中山杉118是落羽杉属BCF₁代杂交种，如果采用种子播种繁殖，后代植株表型易产生分离，导致中山杉118的优良性状无法保存；扦插繁殖需要中山杉118提供大量的插条，因此繁殖材料受到极大的限制；嫁接繁殖需要大量砧木且技术要求高，人工成本高。利用组织培养方法培养繁育中山杉118幼苗，仅需要少量的带芽茎段为外植体，其优点扩繁速度快，成本低，能够在短时间内提供大量优质的幼苗。发明专利CN 102283126 B公开了中山杉302(中山杉118的母本)组织培养增殖方法，但是由于中山杉118是落羽杉属F₂代杂交种与中山杉302的基因型及植株的代谢产物存在不同，因此不能通过简单地照搬用于中山杉118。

针对以上的现状，本发明提供了一种中山杉118的组织培养繁殖方法，其操作简单易行，大大提高了增殖率和增殖速度，从而获得优质的中山杉种苗，从而解决了中山杉118在城市园林绿化，公路绿化，生态建设等方面的需求。

发明内容

本发明的目的在于解决中山杉118种苗的来源，并提供一种繁殖速度快，种苗优质的中山杉118组织培养繁殖方法。

为达到上述目的，本发明提供了一种中山杉118组织培养的繁殖方法，具体步骤如下所述：

(1)外植体选取与消毒：选取春季中山杉118带有腋芽刚萌动的枝条作为外植体，用自来水冲洗枝条，以去除枝条表面的污垢，然后去除多余的叶片，并进行消毒：①用中性洗衣粉洗涤，再流水冲洗2h，滤纸吸干表面水分；②在超净工作台上先用70％酒精浸泡20～30s，无菌水冲洗3次，每次振荡3～5min；③立即转入1‰的升汞溶液中消毒7-10min，最后用无菌水洗涤3～5次，每次振荡3～5min。

(2)改良1/2MS培养基的制备：用Ca(NO₃)₂.4H₂O 228mg/L代替原1/2MS培养基中的CaCl₂.2H₂O，用K₂SO₄730mg/L代替原1/2MS培养基中的KNO₃，同时加入活性炭，浓度为：1500mg/L，其他组分均无变化。