[发明专利]与人血管内皮生长因子特异性结合的抗体或其抗原结合片段及其用途

说明书

本发明提出了能够特异性与人血管内皮生长因子结合的抗体或其抗原结合片段及其用途。该抗体或其抗原结合片段包括：具有下列至少之一氨基酸序列的重链可变区：(1)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，(2)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，(3)SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列，(4)与(1)～(3)相比具有一个以上氨基酸保守突变的氨基酸序列。根据本发明实施例的抗体或其抗原结合片段，能够特异性识别人血管内皮生长因子，并且能够有效地阻断人血管内皮生长因子与其受体的结合，进而阻断人血管内皮生长因子受体例如VEGFR1或2的相关信号通路，从而可以有效地抑制肿瘤的增长。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，更具体的，本发明涉及与人血管内皮生长因子特异性结合的抗体或其抗原结合片段及其用途。进一步，本发明涉及与人血管内皮生长因子特异性结合的抗体或其抗原结合片段、分离的多核苷酸、制备该抗体或其抗原结合片段的方法、杂交瘤、杂交瘤在制备单克隆抗体中的用途、包含该抗体或其抗原结合片段、该多核苷酸或该杂交瘤的药物组合物、用于鉴定能够与人血管内皮生长因子结合的药物的方法、药物联合。

背景技术

1971年Folkman首先观察到当肿瘤体积超过1-2mm³，需要新血管的形成来维持生长，从而最早提出肿瘤生长是血管依赖性的，并指出抗血管生成是控制肿瘤生长的新途径。已有研究表明，几乎所有实体瘤的生长和转移都依赖于肿瘤新血管的生成。

1989年Ferrara N发现了血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor，VEGF)，后来被证明是目前发现的最重要的血管形成因子之一，在肿瘤的血管生长中发挥着重要作用。对肿瘤的浸润和转移有重要影响，在肿瘤的血管发生过程中发挥极其重要的作用。VEGF既可以用于肿瘤治疗的理想靶点，也可以作为进行肿瘤诊断和判断预后的标志物。VEGF是相对分子质量34000-42000Da的高度糖基化碱性同源二聚体糖蛋白，其编码基因位于染色体的6q21.3，全长14kb，含有8个外显子和7个内含子，可形成9种异构体，主要包括VEGF121、VEGF165、VEGF189和VEGF206。其中多数组织以表达VEGF165为主。

VEGF和VEGFR2之间的结合是肿瘤血管生成的关键，阻断他们之间的“同形体”则抑制肿瘤血管生成。抗VEGFR2抗体对比贝伐单抗，可同时阻断VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E的作用，具有更有效的抗血管生成效果，因而对肿瘤在体内转移具有特别抑制性。

然而，目前特异性识别VEGF的抗体仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本发明的一个目的在于提出一种能够特异性与人血管内皮生长因子结合的抗体或其抗原结合片段及其用途。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种与人血管内皮生长因子(huVEGF，在本文中如无特别说明，VEGF指的是人血管内皮生长因子)特异性结合的抗体或其抗原结合片段。根据本发明的实施例，该抗体或其抗原结合片段包括：具有下列至少之一氨基酸序列的重链可变区：(1)SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列(GYTFTNYGLN)，(2)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列(WINTYTGEPTYADDFKG)，(3)SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列(YGITYEWYFDV)，(4)与(1)～(3)相比具有一个以上氨基酸保守突变的氨基酸序列。序列可以包含某些生物学功能等同的氨基酸或“保守性替代”，其它序列可以包含功能非等同的氨基酸或“非保守性替代”，其经基因工程改造以改进CDR或含CDR抗体的特性。