[发明专利]不受血清内源性氨干扰的测定尿素含量的检测试剂盒在审
申请号: | 201410401509.7 | 申请日: | 2014-08-14 |
公开(公告)号: | CN104198421A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
发明(设计)人: | 李伟奇;陈瑛;房君江;张秀文;林清玉 | 申请(专利权)人: | 上海睿康生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 201112 上海市闵行区联航路1*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 不受 血清 内源 干扰 测定 尿素 含量 检测 试剂盒 | ||
1.一种不受血清内源性氨干扰的测定尿素含量的检测试剂盒,其特征在于,包含试剂R1和试剂R2;所述试剂R1含有1~500mmol/L pH=3.0~8.0的缓冲液、1~80KU/L谷氨酸脱氢酶、0.5~2KU/L NADH、1~100mmol/Lα-酮戊二酸、1‰~5‰表面活性剂和0.1~1g/L防腐剂;所述试剂R2含有1~500mmol/L pH=3.0~8.0的缓冲液、1~60KU/L尿素酶、0.5~2KU/L NADH、1~100mmol/Lα-酮戊二酸、10~500mmol/L氯化钠、1~50mmol/L酶保护剂和0.1~1g/L防腐剂。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1含有100~300mmol/L pH=5.0~8.0的缓冲液、20~60KU/L谷氨酸脱氢酶、1~1.5KU/L NADH、50~100mmol/Lα-酮戊二酸、1‰~5‰表面活性剂和0.2~0.8g/L防腐剂;所述试剂R2含有100~300mmol/L pH=5.0~8.0的缓冲液、10~30KU/L尿素酶、1~1.5KU/L NADH、50~100mmol/Lα-酮戊二酸、100~300mmol/L氯化钠、10~40mmol/L酶保护剂和0.2~0.8g/L防腐剂。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的缓冲液分别选自TRIS、MOPS、HEPES或BICN。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的缓冲液均为TRIS。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述酶保护剂为二甲基亚砜。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述表面活性剂为吐温20、吐温80或曲拉通X-100。
7.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的防腐剂分别选自叠氮化钠、proclin300、聚赖氨酸或乙酸钠。
8.一种根据权利要求1~7中任一项所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,试剂R1加入样本后37℃孵育5分钟,再加入试剂R2,37℃孵育1.5分钟,连续监测3分钟的吸光度变化率,与Urea标准品的尿素含量与吸光度关系曲线进行比较,得到样本的尿素含量。
9.根据权利要求8所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述监测采用的主波长为340nm,副波长为405nm。
10.根据权利要求8所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述试剂R1和试剂R2的体积比为4∶1。
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