[发明专利]不受血清内源性氨干扰的测定尿素含量的检测试剂盒在审

专利信息
申请号: 201410401509.7 申请日: 2014-08-14
公开(公告)号: CN104198421A 公开(公告)日: 2014-12-10
发明(设计)人: 李伟奇;陈瑛;房君江;张秀文;林清玉 申请(专利权)人: 上海睿康生物科技有限公司
主分类号: G01N21/33 分类号: G01N21/33
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中
地址: 201112 上海市闵行区联航路1*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 不受 血清 内源 干扰 测定 尿素 含量 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种不受血清内源性氨干扰的测定尿素含量的检测试剂盒,其特征在于,包含试剂R1和试剂R2;所述试剂R1含有1~500mmol/L pH=3.0~8.0的缓冲液、1~80KU/L谷氨酸脱氢酶、0.5~2KU/L NADH、1~100mmol/Lα-酮戊二酸、1‰~5‰表面活性剂和0.1~1g/L防腐剂;所述试剂R2含有1~500mmol/L pH=3.0~8.0的缓冲液、1~60KU/L尿素酶、0.5~2KU/L NADH、1~100mmol/Lα-酮戊二酸、10~500mmol/L氯化钠、1~50mmol/L酶保护剂和0.1~1g/L防腐剂。

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1含有100~300mmol/L pH=5.0~8.0的缓冲液、20~60KU/L谷氨酸脱氢酶、1~1.5KU/L NADH、50~100mmol/Lα-酮戊二酸、1‰~5‰表面活性剂和0.2~0.8g/L防腐剂;所述试剂R2含有100~300mmol/L pH=5.0~8.0的缓冲液、10~30KU/L尿素酶、1~1.5KU/L NADH、50~100mmol/Lα-酮戊二酸、100~300mmol/L氯化钠、10~40mmol/L酶保护剂和0.2~0.8g/L防腐剂。

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的缓冲液分别选自TRIS、MOPS、HEPES或BICN。

4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的缓冲液均为TRIS。

5.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述酶保护剂为二甲基亚砜。

6.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述表面活性剂为吐温20、吐温80或曲拉通X-100。

7.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1、R2中包含的防腐剂分别选自叠氮化钠、proclin300、聚赖氨酸或乙酸钠。

8.一种根据权利要求1~7中任一项所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,试剂R1加入样本后37℃孵育5分钟,再加入试剂R2,37℃孵育1.5分钟,连续监测3分钟的吸光度变化率,与Urea标准品的尿素含量与吸光度关系曲线进行比较,得到样本的尿素含量。

9.根据权利要求8所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述监测采用的主波长为340nm,副波长为405nm。

10.根据权利要求8所述的检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述试剂R1和试剂R2的体积比为4∶1。

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