[发明专利]一种载VEGF和万古霉素的多层缓释微球制剂、制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于药物缓释微球技术领域，具体涉及一种以海藻酸钠、壳聚糖为载体的载血管内皮细胞生长因子(VEGF)和万古霉素(VCM)的多层局部用缓释微球制剂、制备方法及其在制备治疗骨缺损、骨组织再生、创伤愈合的药物中的应用。

背景技术

近年来，随着人们对生活质量和身体健康的日益关注，以及经济的迅猛发展所带来的道路交通和工伤事故，使骨缺损的临床诊治变得复杂起来。对于大段的骨缺损，构建的组织工程骨中心部位血供受限，易于发生营养障碍；复杂骨折常常骨缺损和感染并发；此时单纯的组织工程骨移植很有可能会因为局部感染无法控制而引发移植物感染，进而导致移植失败。因此，如何在构建组织工程骨组织的同时，促进小血管长入以及细胞与材料复合物内血供的重建，并控制缺损局部微生物感染成为骨组织工程由基础向临床应用的关键性环节。

血管内皮细胞生长因子(VEGF)对血管具有再生作用，其能够通过促进血管内皮细胞的有丝分裂、血管通透性的增加等方式促进局部血管的再生。VEGF在体内的半衰期短，直接应用难以达到促血管生成的目的，但如果采用首次大剂量给药，易导致局部血管瘤。万古霉素(VCM，Vancomycin)是治疗骨和关节感染的常用抗生素，由一种链霉菌产生的、结构复杂的糖肽类构成，专一地抑制肽聚糖的生物合成来抑制革兰氏阳性菌，主要用于葡萄球菌(包括耐青霉素和耐新青霉素株)引起的感染。常规抗感染主要是口服或静脉给药，虽说可以取得一定疗效，但是给予药物剂量大，容易引发副作用；而且，对于严重骨组织感染的患者，在感染骨组织周围血流减慢、减少，容易形成血液中的高浓度而局部骨组织低浓度的现象，降低了药物在局部的治疗作用。近几年来，开发局部应用的抗生素及促血管生成的缓释药物取得了一定进展，但是均是负载单种药物的缓释剂型，载药量及包封率较低，而且突释现象较为严重，且两种药物同时局部应用增加了应用的复杂性。鉴于此，联合应用抗炎及血管化药物并实现其差异性和程序性可控释放，减小药物毒副作用，充分发挥其持久协同的治疗效果，对于骨缺损的修复及抗感染的治疗具有极其重要的意义。

随着局部药物缓释研究的不断深入彻底改变了常规的连续间断性的给药方式，只要在局部组织内放置可以缓释药物的载体，就可以实现局部持续有效给药，提高局部药物浓度，降低药物毒性，延长药物作用时间，延长用药间隔，减少用药次数，提高病人用药顺应性和用药水平，极大地提高了治疗的依从性。海藻酸盐及壳聚糖在医药领域、食品加工领域等均已得到开发及利用，大量研究表明：壳聚糖具有良好的生物活性、生物相容性、生物降解性，它可以促进伤口愈合和组织修复，在新型伤口敷料和组织工程方面的应用倍受人们关注；海藻酸盐可以用于制造新型伤口敷料，它可以在伤口表面原位形成凝胶，创造有利于伤口愈合的湿润密闭愈合环境，海藻酸盐及壳聚糖均已被FDA批准为药物辅料。

层层自组装技术(LbL)是基于聚电解质阴阳离子所带正负电荷间相互作用的一种自组装超分子技术。该技术的主要特点是在表面荷电的基材表面通过静电相互作用交替地吸附上带相反电荷的聚电解质阴阳离子。近年来，层层组装技术由于其制备条件温和(在水溶液中)、利于保持药物活性、负载药物方式多样、药物负载量精确可控、智能响应释放药物等优点成为构筑药物控释功能性膜材料的重要方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有良好的生物相容性及生物可降解性、不使用有机溶剂、载VEGF和万古霉素的多层缓释微球制剂。

本发明的另一目的在于提供一种制备工艺简单，温和无污染，药物程序性、可控性逐层释放的载VEGF和万古霉素的多层缓释微球制剂的制备方法。

本发明所述的一种载有VEGF和万古霉素的多层缓释微球制剂，其为多层核壳结构，核心球为载有VEGF的海藻酸盐，第一层壳为载有万古霉素的壳聚糖，第二层壳为载有VEGF的海藻酸钠，第二层壳为载有万古霉素的壳聚糖。

在本发明的另一方面，提供了一种载VEGF及万古霉素的多层缓释微球制剂的制备方法，包括以下步骤：