[发明专利]一种检测禽流感病毒及其H3、N2亚型的引物及其应用在审
申请号: | 201410408502.8 | 申请日: | 2014-08-19 |
公开(公告)号: | CN105368981A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 谢芝勋;刘婷婷;罗思思;谢丽基;李孟;谢志勤;邓显文 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
地址: | 530001 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 禽流感 病毒 及其 h3 n2 引物 应用 | ||
1.一组引物,由如下(1)-(6)所示的DNA分子组成:
(1)SEQIDNo.1所示的DNA分子;
(2)SEQIDNo.2所示的DNA分子;
(3)SEQIDNo.3所示的DNA分子;
(4)SEQIDNo.4所示的DNA分子;
(5)SEQIDNo.5所示的DNA分子;
(6)SEQIDNo.6所示的DNA分子。
2.一种鉴定或辅助鉴定待测样品中禽流感病毒及待测样品中H3亚型和/或N2亚 型禽流感病毒的试剂盒,该试剂盒包含权利要求1所述的引物。
3.一种鉴定或辅助鉴定待测样品中禽流感病毒及待测样品中H3亚型和/或N2亚 型禽流感病毒的方法,包括如下步骤:以待测样品的cDNA为模板,以权利要求1所述 的引物为引物进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;如果PCR扩增产物含有大小为518bp 的条带,则待测样品候选为含有禽流感病毒的样品;如果PCR扩增产物同时含有大小 分别为518bp和271bp的条带,则待测样品候选为含有H3亚型禽流感病毒的样品; 如果PCR扩增产物同时含有大小分别为518bp和418bp的条带,则待测样品候选为 含有N2亚型禽流感病毒的样品;如果PCR扩增产物同时含有大小分别为518bp、418 bp和271bp的条带,则待测样品候选为含有H3N2亚型禽流感病毒的样品。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述PCR的反应体系如下:2×PCR 扩增缓冲液12.5uL,浓度为25pmol/uL的SEQIDNo.1所示的DNA分子、SEQIDNo.2 所示的DNA分子、SEQIDNo.3所示的DNA分子、SEQIDNo.4所示的DNA分子、SEQID No.5所示的DNA分子和SEQIDNo.6所示的DNA分子均为0.5uL,模板cDNA2uL, 加ddH2O补足体系至25uL。
5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:所述PCR的反应程序如下:94℃ 4min;94℃45s,55℃45s,72℃1min,35个循环;72℃延伸10min,最 后4℃结束反应。
6.权利要求1所述的引物在制备鉴定或辅助鉴定待测样品中禽流感病毒及待测 样品中H3亚型和/或N2亚型禽流感病毒的产品中的应用。
7.权利要求2所述的试剂盒在制备鉴定或辅助鉴定待测样品中禽流感病毒及待 测样品中H3亚型和/或N2亚型禽流感病毒的产品中的应用。
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