[发明专利]一种高效产透明质酸的重组菌的构建方法有效
| 申请号： | 201410415767.0 | 申请日： | 2014-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN105368761B | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 陶勇;韩剑;郭东会 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/04;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 100101 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 透明 重组 构建 方法 | ||
1.一种重组菌，是将PmHasA蛋白的编码基因和PmHasB蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中得到的；
所述的PmHasA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2中自N端起第1-972位氨基酸所示；所述的PmHasB蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.4中自N端起第1-390位氨基酸所示。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述SEQ ID No.2中自N端起第1-972位氨基酸所示的PmHasA蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述SEQ ID No.4中自N端起第1-390位氨基酸所示的PmHasB蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
3.根据权利要求1或2所述的重组菌，其特征在于：所述宿主大肠杆菌为E.coliBW25113。
4.权利要求1-3任一所述的重组菌在制备透明质酸中的应用。
5.一种制备透明质酸的方法，包括如下步骤：诱导权利要求1-3任一所述重组菌表达所述PmHasA蛋白和PmHasB蛋白，得到诱导后的重组菌；将诱导后的重组菌加入转化液中，进行生物转化，得到透明质酸。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述转化液中的底物为葡萄糖和N-乙酰葡萄糖胺。
7.一种重组菌，是将SEQ ID No.4中自N端起第1-390位氨基酸所示的PmHasB蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中得到的；所述SEQ ID No.4中自N端起第1-390位氨基酸所示的PmHasB蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；所述宿主大肠杆菌为E.coliBL21（DE3）。
8.权利要求7所述的重组菌在制备酶活性提高的UDP-葡萄糖脱氢酶中的应用；UDP-葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID No.4中自N端起第1-390位所示。
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