[发明专利]一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法

权利要求书

1. 一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法，其特征在于：首先利用乙腈对烟草基质中残留的四溴菊酯和溴氰菊酯进行提取，加入一定量的硫酸镁、氯化钠、脱水柠檬酸钠、柠檬酸氢钠进行振荡，离心后吸取一定量的上清液进行氮吹浓缩，达到一定浓度后，进行固相萃取对其进行净化处理，氮气吹干后利用乙腈溶剂进行复溶，过0.22 μm有机相滤膜后，利用超高效合相色谱仪对其中的四溴菊酯和溴氰菊酯进行浓度分析。

2.根据权利要求1所述的利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法，其特征在于：所述分析方法的具体步骤如下：

1)样品的提取

首先称取2.0 g已粉碎的烟草样品于50 mL具塞离心管中，加入10 mL超纯水浸润样品，静置10 min，取10 mL乙腈到离心管中，于旋涡混合器上以2000 rpm速度振荡1 min，把离心管放入-20°C冰箱冷冻10 min，然后向离心管中加入盐析试剂包（含4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢钠），立即于旋涡混合器上以2000 rpm振荡2 min，以5000 rpm离心3 min，取5mL上清液氮吹浓缩至1mL；

2)样品的固相萃取净化

采用弗罗里硅土小柱作为固相萃取柱，正己烷与丙酮的混合液（95:5，v/v）作为洗脱液，对浓缩好的样品进行固相萃取净化处理，具体操作步骤分为：首先，利用6 mL洗脱液对弗罗里硅土小柱进行活化处理；其次，将上一步所获得的1mL浓缩液注入至弗罗里硅土小柱上；第三步，利用5 ml洗脱液对小柱进行洗涤，收集全部洗涤液；第四步，注入3 mL空气以排净小柱上残留的液体；

 3)浓缩、复溶及过滤

首先以氮吹仪对收集的洗脱液浓缩近干，然后加入1 mL乙腈复溶，并利用0.22 μm有机相滤膜对样品进行过滤，作为样品待测液；

4)标准工作溶液配制

四溴菊酯和溴氰菊酯的系列标准溶液浓度均为：0.1 μg/mL、0.25 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.5 μg/mL，5.0 μg /mL；

5)合相色谱分析

采用超高效合相色谱仪对标准工作溶液和样品待测液进行浓度分析，紫外检测器进行检测，外标法定量；

色谱条件：采用色谱柱为Acquity UPC² CSH Fluoro-Phenyl色谱柱；ABPR压力为1800 psi；色谱柱温度为40 ℃；进样量为5-10 μL；流动相分别为CO₂（流动相A）和甲醇（流动相B），流速为1.5 mL/min，流动相梯度洗脱程序如表1；紫外检测波长为215 nm；

表1 梯度洗脱程序

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3.根据权利要求1所述的利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法，其特征在于：标准工作溶液配制的具体方法如下：

四溴菊酯和溴氰菊酯单标储备液：准确称取10.0 mg（精确到0.1 mg）标准品，置于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，配制成质量浓度为1000.0 μg/mL的单标储备液，贮存在-20°C冰箱中备用；

混合标准工作溶液：分别取四溴菊酯和溴氰菊酯单标储备液0.5ml于100 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，配制成两种农药组分质量浓度分别为5.0 μg/mL的混合工作储备液，储存在4°C冰箱中备用；

系列标准溶液配制：准确移取0.2 mL、0.5 mL、1 mL、2 mL、5 mL的混合标准工作溶液，置于10 mL容量瓶中，用乙腈定容，即得系列标准工作溶液，具体浓度为：0.1 μg/mL、0.25 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.5 μg/mL，5.0 μg /mL。