[发明专利]一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法

说明书

 

技术领域：

本发明涉及农药残留检测技术领域，具体是一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯和溴氰菊酯残留的定量分析方法。

背景技术：

四溴菊酯是一种溴氰菊酯与溴通过加成反应所获得的具有高活性的防虫类农药，共包含两个异构体。该农药对于防治鞘翅目、双翅目、半翅目等烟草中多发的害虫具有十分显著的效果，因此被广泛用于烟草的种植。溴氰菊酯本身也是一种杀虫剂，对鳞翅目幼虫具有良好的防治效果，常被用于种植过程对烟草作物的保护。四溴菊酯和溴氰菊酯不但对鱼、虾等水生生物以及有益昆虫具有危害，在烟草中的残留也会加重对吸烟者及周围人群的健康危害风险。因此，对烟草中存在的这两种农残进行监控具有重要意义。

四溴菊酯和溴氰菊酯在结构上具有很大的相似性，同时检测具有较高的难度。目前，国内外报道的四溴菊酯的检测方法主要为气相色谱法(GC)、气相色谱－质谱法(GC－MS)以及高效液相色谱法（HPLC）。其中，气相色谱的应用最为广泛。但是，由于在气相色谱的进样口280℃左右的高温作用下，四溴菊酯发生分解生成溴氰菊酯，利用气相色谱法实际上测得的只能是四溴菊酯转化溴氰菊酯以及本身所存在的溴氰菊酯的总量，并不能对这两种农药残留进行分别定量。而合相色谱运行温度一般控制在50 ℃左右，在此温度下，四溴菊酯性质稳定，未发现转化成溴氰菊酯的现象，因此，利用合相色谱同时检测烟草中的四溴菊酯及溴氰菊酯具有一定的实际应用价值，可以更好地了解烟草中农药残留情况。

 

发明内容：

本发明的目的正是基于上述现有技术状况而提供的一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法，是以新兴的合相色谱技术完成烟草中四溴菊酯和溴氰菊酯的同时快速分析，主要是先利用QuRChERS前处理技术以及固相萃取技术进行预处理，然后采用超高效合相色谱仪对四溴菊酯及溴氰菊酯进行同时检测，并通过外标法进行定量分析。本方法仪器分析快速，有机溶剂用量极少，是一种集高效、灵敏、绿色等多种优点于一体的分析方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种利用合相色谱同时检测烟草中四溴菊酯及溴氰菊酯的分析方法，首先利用乙腈对烟草基质中残留的四溴菊酯和溴氰菊酯进行提取，加入一定量的硫酸镁、氯化钠、脱水柠檬酸钠、柠檬酸氢钠进行振荡，离心后吸取一定量的上清液进行氮吹浓缩，达到一定浓度后，进行固相萃取对其进行净化处理，氮气吹干后利用乙腈溶剂进行复溶，过0.22 μm有机相滤膜后，利用超高效合相色谱仪对其中的四溴菊酯和溴氰菊酯进行浓度分析,具体步骤如下：

1)样品的提取

为获得良好的提取效果，首先称取2.0 g已粉碎的烟草样品于50 mL具塞离心管中，加入10 mL超纯水浸润样品，静置10 min，取10 mL乙腈到离心管中，于旋涡混合器上以2000 rpm速度振荡1 min，把离心管放入-20°C冰箱冷冻10 min，以防止盐析过程中的产热造成某些目标物质分解。然后向离心管中加入盐析试剂包（含4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠），立即于旋涡混合器上以2000 rpm振荡2 min，以5000 rpm离心3 min，取5mL上清液氮吹浓缩至1mL；

2)样品的固相萃取净化

采用弗罗里硅土小柱作为固相萃取柱，正己烷与丙酮的混合液（95:5，v/v）作为洗脱液，对浓缩好的样品进行固相萃取净化处理，具体操作步骤分为：首先，利用6 mL洗脱液对弗罗里硅土小柱进行活化处理；其次，将上一步所获得的1mL浓缩液注入至弗罗里硅土小柱上；第三步，利用5 ml洗脱液对小柱进行洗涤，收集全部洗涤液；第四步，注入3 mL空气以排净小柱上残留的液体；该步骤能有效地降低烟草样品中的基质干扰。

3)浓缩、复溶及过滤

为保证超高效合相色谱仪分析工作的顺利进行，同时实现精确定量，需将提取液溶剂更换为1 mL乙腈，具体的做法为：首先以氮吹仪对收集的洗脱液浓缩近干，然后加入1 mL乙腈复溶，并利用0.22 μm有机相滤膜对样品进行过滤，作为样品待测液；

4)标准工作溶液配制

标准工作溶液配制的具体方法如下：

四溴菊酯和溴氰菊酯单标储备液：准确称取10.0 mg（精确到0.1 mg）标准品，置于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，配制成质量浓度为1000.0 μg/mL的单标储备液，贮存在-20°C冰箱中备用；