[发明专利]四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性和甲基转移酶抑制剂浓度上的应用有效
申请号: | 201410417947.2 | 申请日: | 2014-08-20 |
公开(公告)号: | CN104195242A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
发明(设计)人: | 于聪;陈健;王燕;李文英;周会鹏;李永新 | 申请(专利权)人: | 中国科学院长春应用化学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/48;C12Q1/44 |
代理公司: | 长春菁华专利商标代理事务所 22210 | 代理人: | 李外 |
地址: | 130022 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苯乙烯 衍生物 检测 甲基转移酶 活性 抑制剂 浓度 应用 | ||
1.四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用。
2.根据权利要求1所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用,其特征在于,四苯乙烯衍生物检测甲基转移酶活性的方法,包括:
步骤一:制备淬灭分子修饰的双链核酸;
步骤二:将步骤一得到的淬灭分子修饰的双链核酸与S-腺苷甲硫氨酸、限制性内切酶、不同浓度的甲基转移酶和酶反应的缓冲溶液反应,得到混合溶液;
步骤三:将步骤二得到的混合溶液与四苯乙烯衍生物水溶液反应,对甲基转移酶的活性进行检测。
3.根据权利要求2所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用,其特征在于,所述的甲基转移酶为Dam、HpaII MTase或M.SssI。
4.根据权利要求2所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用,其特征在于,所述的甲基转移酶的浓度范围为0-160U/mL。
5.根据权利要求2所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用,其特征在于,所述的步骤二的反应是先在37℃反应5h,然后再升温至90℃反应10min。
6.根据权利要求2所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶活性上的应用,其特征在于,所述的四苯乙烯衍生物的结构式为:
7.四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用。
8.根据权利要求7所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用,其特征在于,四苯乙烯衍生物检测甲基转移酶抑制剂的方法,包括:
步骤一:制备淬灭分子修饰的双链核酸;
步骤二:将步骤一得到的淬灭分子修饰的双链核酸与S-腺苷甲硫氨酸、限制性内切酶、甲基转移酶、不同浓度的甲基转移酶抑制剂和酶反应的缓冲溶液反应,得到混合溶液;
步骤三:将步骤二得到的混合溶液与四苯乙烯衍生物水溶液反应,对甲基转移酶抑制剂的浓度进行检测。
9.根据权利要求8所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用,其特征在于,所述的甲基转移酶抑制剂为庆大霉素、5-氟尿嘧啶、卞青霉素或丝裂霉素。
10.根据权利要求8所述的四苯乙烯衍生物在检测甲基转移酶抑制剂浓度上的应用,其特征在于,所述的四苯乙烯衍生物的结构式为:
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