[发明专利]基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括蛋白、EDC缩合剂、核壳量子点、能与所述蛋白特异性结合的待测抗原第一抗体和包被待测抗原第二抗体的微孔板；

所述蛋白为蛋白G或者蛋白A，所述核壳量子点为CdTe/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnSe或CdSe/ZnS。

2.根据权利要求1所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液。

3.根据权利要求1所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述包被待测抗原第二抗体的微孔板可以由微孔板和待测抗原的第二抗体替代。

4.根据权利要求3所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括1％的脱脂奶粉。

5.根据权利要求1所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述第一抗体为乙肝表面抗体或者乙肝e抗体，第二抗体为乙肝表面抗体或者乙肝e抗体。

6.根据权利要求1所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述蛋白、EDC缩合剂、核壳量子点的物质的量比为1:(100-200):1。

7.根据权利要求1所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述蛋白、能与所述蛋白特异性结合的待测抗原第一抗体的物质的量比为1:1，所述待测抗原第二抗体的物质的量大于等于蛋白的物质的量。

8.权利要求1-2、5-7任何一项所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将蛋白和核壳量子点在EDC缩合剂的作用下进行共价连接，得到核壳量子点标记的蛋白；

(2)将步骤(1)得到的核壳量子点标记的蛋白与能与该蛋白特异性结合的待测抗原第一抗体混合，得到量子点抗体柔性偶联标记产物；

(3)将含有待测抗原的待测液加入包被待测抗原第二抗体的微孔板中，进行免疫反应，洗涤后，再向微孔板中加入量子点抗体柔性偶联标记产物，进行免疫反应，洗涤后，得到涂有标记产物的微孔板；

(4)检测涂有标记产物的微孔板中核壳量子点的荧光强度，通过与空白样品的荧光光谱进行对比，得到待测抗原的浓度。

9.根据权利要求8所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于，当包被待测抗原第二抗体的微孔板由微孔板和待测抗原的第二抗体替代时，步骤(3)前还包括，将待测抗原第二抗体加入微孔板中，反应后，加入1％的脱脂奶粉封闭微孔板的位点，洗涤，得到包被待测抗原第二抗体的微孔板。

10.根据权利要求8或9所述的基于核壳量子点柔性偶联标记物的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述步骤(2)在23-25℃反应30-60min；所述步骤(3)中免疫反应的温度均为37℃，时间均为0.5-1h。