[发明专利]一种多粘类芽胞杆菌发酵生产粘杆菌素的培养基和补料方法

权利要求书

1.一种多粘类芽胞杆菌发酵生产粘杆菌素的培养方法，包括种子培养和发酵培养，其特征在于所述种子培养过程中采用如下培养基组成：麸皮5～10g/L，麦芽提取物10～15g/L，鱼粉2～6g/L，玉米浆11～15ml/L，烘培豆粉15～20g/L，啤酒酵母浸膏10～15g/L，硫酸铵1～5g/L，轻质碳酸钙1～5g/L，橄榄油或菜籽油3～7ml/L；

所述发酵培养过程中采用如下培养基组成：麸皮9～13g/L，麦芽提取物15～20g/L，鱼粉4～8g/L，玉米浆15～19ml/L，烘培豆粉20～25g/L，啤酒酵母浸膏15～19g/L，硫酸铵4～8g/L，轻质碳酸钙5～9g/L，磷酸二氢钾0.3～0.7g/L，橄榄油或菜籽油15～20ml/L，氯化钠0.2～0.6g/L，硫酸镁0.1～0.5g/L，硫酸亚铁0.1～0.5g/L，消泡剂0.03～0.08ml/L，麦芽糖酶0.002～0.006g/L；

且在发酵过程中采用流加法进行补料，补料包括补氨水、补糖和补水，其中

a 补糖工艺控制：

发酵前10h不用进行补麦芽汁，

发酵时间在11～30h，当还原糖含量低于15%，补入麦芽汁，控制还原糖含量为15～20%，每隔3～5h检测发酵液还原糖含量，

发酵时间在31～60h，当还原糖含量低于8%，补入麦芽汁，控制还原糖含量为8～10%，每隔3～5h检测发酵液还原糖含量，

发酵时间在61h～90h，当还原糖含量低于5%，补入麦芽汁，控制还原糖含量为5～8%，每隔3～5h检测发酵液脂肪含量，

发酵时间在91h～发酵结束，不补入麦芽汁；

b补水工艺控制：

发酵前30h不用进行补水，

发酵时间在31～60h，当菌体浓度高于50%，加入灭菌水，要求控制发酵液菌体浓度在40～45%，每隔3～5h检测发酵液菌体浓度，

发酵时间在61～90h，当菌体浓度高于45%，加入灭菌水，要求控制发酵液菌体浓度在40～45%，每隔3～5h检测发酵液菌体浓度，

发酵时间在91h～发酵结束，当菌体浓度高于40%，加入灭菌水，要求控制发酵液菌体浓度在35～40%，每隔3～5h检测发酵液菌体浓度；

c 补入氨水：氨水浓度控制在15～20%，

发酵前10h，不补入氨水，

发酵11h至40h：氨基氮含量＜15%时，补入已灭菌的氨水溶液，使氨基氮的含量控制在15～20%,

发酵41h至80h：氨基氮含量＜10%时，补入已灭菌的氨水溶液，使氨基氮的含量控制在10～15%,

发酵81h至90h：氨基氮含量＜5%时，补入已灭菌的氨水溶液，使氨基氮的含量控制在5～7%,

发酵91h至发酵结束：还原糖含量＜1%时，补入已灭菌的氨水溶液，使氨基氮的含量控制在1～3%。

2.按照权利要求1所述的多粘类芽胞杆菌发酵生产粘杆菌素的培养方法，其特征在于所述烘培豆粉是指将豆粉在60℃～80℃温度条件下加热80～100min，然后过筛所得，其尿素酶含量≤0.15U。

3.按照权利要求1所述的多粘类芽胞杆菌发酵生产粘杆菌素的培养方法，其特征在于所述麦芽提取物是指将啤酒酿造过程中产生的麦芽废渣经闪蒸干燥、浸提、浓缩、真空干燥、粉碎、分筛后所获得的麦芽提取物，其质量要求为：麦芽提取物过80目筛的量超过80%，氨基氮含量超过35%，可溶性蛋白含量超过14%。

4.按照权利要求1所述的多粘类芽胞杆菌发酵生产粘杆菌素的培养方法，其特征在于所述消泡剂为乳化硅油、聚氧乙烯、聚氧丙烯季戊四醇醚或聚氧丙烯甘油醚。